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畜牧人

標題: 快速估測尿酶活性法 [打印本頁]

作者: chengcai790602    時間: 2007-6-24 18:42
標題: 快速估測尿酶活性法
    目的:在有指示劑酚紅存在的條件下,豆粕(餅)中的尿素酶活性可按尿素轉變成氨的方法定性測定。

方法一:
儀器及試劑
1.培養皿
2.稀硫酸(H2SO40.2N或更稀些,帶滴管。
3.尿素——酚紅試劑。
      1.2克酚紅溶解于30ml0.2NNaOH中,用蒸餾水將之稀釋至約300ml,加入90g尿素并溶解之,用蒸餾水稀釋至2l加入14ml 1.0NH2SO470ml o.2NH2SO4,用蒸餾水稀釋至最后體積3l溶液應具明亮的琥珀色。
    測定步驟
1.在一個150ml的燒杯中倒入少量試劑,注意溶液必須呈明亮的琥珀色。若溶液已轉變為深桔紅色,滴人稀硫酸深液并攪拌之,直至溶液再度呈境拍色。
2.量一場匙粉碎很好的豆餅粉,放置于培養皿中。
3.在樣品上加入兩場匙試劑,輕輕攪拌,將樣品平鋪于培養皿中。若仍有干豆餅斑點,則再加入試劑,直至將豆餅浸濕。
4.放置5分鐘后觀察:
a.沒有任何紅點出現:再任其放置25分鐘,若仍無紅點出現,說明豆餅過熟。
b.少量紅點:少量尿素酶活性,豆餅可用。
c.豆餅表面約有25%為紅點覆蓋:少量尿素酶活性;豆餅可用。
d.豆餅表面約有50%為紅點覆蓋:有尿素酶活性。
e.豆餅表面的75%-100%為紅點覆蓋:尿素酶活性很高,不應接受這種原料,因為豆餅過生。

方法二:
儀器與試劑
1.粉碎裝置(不強烈發熱)
2.天平:感量1%
3.試管:直徑18mm,長180mm
4.尿素:分析純
5.酚紅:分析純 0.1%乙醇(20%)溶液
測定步驟
將所測試樣研細,稱去0.02g,轉移到試管中,加入0.02g結晶尿素及兩滴酚紅指示劑,加之20——30ml蒸餾水,搖動10s。觀察溶液顏色,并記錄呈粉紅色時間。
尿酶活性結果表示:
1min內呈粉紅色為——活性很強
1~5min內呈粉紅色為——活性強
5~15min內呈粉紅色為——有點活性
15~30min內呈粉紅色為——沒有活性
一般在10min以上不顯粉紅色,尿酶活性合格,30min以上不變色說明加熱過度;10min內顯粉紅色說明加熱不足,1min內呈粉紅色說明過生。
                                               

[ 本帖最后由 chengcai790602 于 2007-6-24 18:43 編輯 ]
作者: 長江之水    時間: 2007-6-24 20:49
這兩個方法都很實用。;1s:
作者: 紅色心情    時間: 2007-6-25 09:53
我們現在用的是第二種方法,感覺還行 
作者: chengcai790602    時間: 2007-6-25 11:32
這些方法只能粗略判定生熟度,一般飼料行業用比較簡單、實惠,在科研單位就無法用了哦!:deng:
作者: cdliuq    時間: 2007-6-25 11:42
我們也用第二種方法
作者: cendy    時間: 2007-7-14 20:27
兩種方法都有用過,不過還是第二種好判斷,試劑也容易配點




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