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畜牧人
標題:
快速估測尿酶活性法
[打印本頁]
作者:
chengcai790602
時間:
2007-6-24 18:42
標題:
快速估測尿酶活性法
目的:在有指示劑酚紅存在的條件下,豆粕(餅)中的尿素酶活性可按尿素轉變成氨的方法定性測定。
方法一:
儀器及試劑
1.
培養皿
2.
稀硫酸(
H2SO4
)
0.2N
或更稀些,帶滴管。
3.
尿素——酚紅試劑。
將
1.2
克酚紅溶解于
30ml0.2N
的
NaOH
中,用蒸餾水將之稀釋至約
300ml
,加入
90g
尿素并溶解之,用蒸餾水稀釋至
2l
,
加入
14ml 1.0N
的
H2SO4
或
70ml o.2N
的
H2SO4
,用蒸餾水稀釋至最后體積
3l
,
溶液應具明亮的琥珀色。
測定步驟
1.
在一個
150ml
的燒杯中倒入少量試劑,注意溶液必須呈明亮的琥珀色。若溶液已轉變為深桔紅色,滴人稀硫酸深液并攪拌之,直至溶液再度呈境拍色。
2.
量一場匙粉碎很好的豆餅粉,放置于培養皿中。
3.
在樣品上加入兩場匙試劑,輕輕攪拌,將樣品平鋪于培養皿中。若仍有干豆餅斑點,則再加入試劑,直至將豆餅浸濕。
4.
放置
5
分鐘后觀察:
a.
沒有任何紅點出現:再任其放置
25
分鐘,若仍無紅點出現,說明豆餅過熟。
b.
少量紅點:少量尿素酶活性,豆餅可用。
c.
豆餅表面約有
25
%為紅點覆蓋:少量尿素酶活性;豆餅可用。
d.豆
餅表面約有
50
%為紅點覆蓋:有尿素酶活性。
e.
豆餅表面的
75
%-
100
%為紅點覆蓋:尿素酶活性很高,不應接受這種原料,因為豆餅過生。
方法二:
儀器與試劑
1.
粉碎裝置(不強烈發熱)
2.
天平:感量
1%
3.
試管:直徑
18mm
,長
180mm
4.
尿素:分析純
5.
酚紅:分析純
0.1%
乙醇(
20%
)溶液
測定步驟
將所測試樣研細,稱去
0.02g
,轉移到試管中,加入
0.02g
結晶尿素及兩滴酚紅指示劑,加之
20
——
30ml
蒸餾水,搖動
10s
。觀察溶液顏色,并記錄呈粉紅色時間。
尿酶活性結果表示:
1min
內呈粉紅色為——活性很強
1~5min
內呈粉紅色為——活性強
5~15min
內呈粉紅色為——有點活性
15~30min
內呈粉紅色為——沒有活性
一般在
10min
以上不顯粉紅色,尿酶活性合格,
30min
以上不變色說明加熱過度;
10min
內顯粉紅色說明加熱不足,
1min
內呈粉紅色說明過生。
[
本帖最后由 chengcai790602 于 2007-6-24 18:43 編輯
]
作者:
長江之水
時間:
2007-6-24 20:49
這兩個方法都很實用。;1s:
作者:
紅色心情
時間:
2007-6-25 09:53
我們現在用的是第二種方法,感覺還行
作者:
chengcai790602
時間:
2007-6-25 11:32
這些方法只能粗略判定生熟度,一般飼料行業用比較簡單、實惠,在科研單位就無法用了哦!:deng:
作者:
cdliuq
時間:
2007-6-25 11:42
我們也用第二種方法
作者:
cendy
時間:
2007-7-14 20:27
兩種方法都有用過,不過還是第二種好判斷,試劑也容易配點
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