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畜牧人

標題: 偽狂犬病 [打印本頁]

作者: 魁罡 時間: 2008-10-16 22:43
標題: 偽狂犬病
偽狂犬病(Pseudorabies，PR又名Aujeszky's disease，AD)是由偽狂犬病毒(Pseudorabies Virus，PRV)引起的一種傳染病。該病最早發現于美國，后來由匈牙利科學家首先分離出病毒。20世紀中期，PR在東歐及巴爾干半島的國家流行較廣，60年代之前，豬被感染后其癥狀比較溫和，在養豬業中未造成重大經濟損失。然而在60一70年代，由于強毒株的出現，豬場爆發Pr的數量顯著增加，而且各種日齡的豬均可感染，其癥狀明顯加劇。這種變化不僅存在于美國，在西歐各國如德國、法國、意大利、比利時、愛爾蘭等國家也同樣存在。幾年之后，此病相繼傳入新西蘭、日本、我國的臺灣及南美的一些國家和地區。目前世界上有40多個國家都有本病報道，據不完全統計，我國已有20多個省、市流行過本病，近幾年PR在我國許多省(市)種豬場呈爆發流行趨勢。現將PR的病原、流行病學、臨床癥狀、診斷、防治等作一概述。
　　1 病原
　　1.1 病原及其感染特點
　　PRV屬皰診病毒科皰疹病毒甲亞科，暫定水痘病毒屬，病毒粒子呈橢圓或圓形，無囊膜粒子直徑為110-150nm；有囊膜的成熟病毒粒子直徑180nm。囊膜表面有呈放射排列的纖突，長8-1Onm，DNA分子量為87×l06。
　　PRV是皰疹病毒中抵抗力較強的一種。在物體表面和液體中可存活7d。在pH4-9之間保持穩定。腐敗條件下，病料中的病毒經lld失去感染力。PRV對乙醚、氯仿等脂溶劑，福爾馬林和紫外線照射等敏感。5%石碳酸經2min滅活，0.5%-1%氫氧化鈉使其滅活。對熱的抵抗力較強，55-60℃經30-50min才能滅活，80℃經3min滅活。
　　迄今為止，還沒有發現抗原性不同的PRV毒株。在病毒與宿主的相互作用中，病毒的糖蛋白起著重要作用，現已發現在PRV至少有gⅠ、gⅡ、gⅢ、gp50、gp63、gX、gH、gL、gM、gN和gK等11種糖蛋白。
　　1.2 感染特點
　　1.2.1 潛伏感染被感染豬不表現臨床癥狀，但感染性病毒卻能在豬體內長期以潛伏狀態存在，也分離不到病毒，但用聚合酶探針方法可查出病毒基因組DNA的存在，在外界不良環境刺激等造成的免疫力減弱時，潛伏狀態的病毒可轉化為具有感染性的病毒。
　　1.2 隱性感染在豬群使用疫苗接種或自然感染部分少量病毒后，該豬只得到部分免疫，可發生隱性感染豬和表現為亞臨床癥狀的豬，這種帶毒豬排毒可持續一年以上。
　　2 流行病學
　　2.1 易感動物 PRV是感染動物種類多和致病性強的一種病毒。除各種年齡的豬、牛都易感外，在自然條件下使羊、犬、貓、兔、鼠、水貂、狐等動物感染發病。實驗動物中家兔、豚鼠、小鼠都易感。其中以家兔最敏感。
　　2.2 傳播形式
　　2.2.1 垂直傳播 PRV可通過胎盤而傳遞給子體，而母體免疫球蛋白卻不能，所以對胎兒的感染是致命的。
　　2.2.2 媒體傳播帶有病毒的空氣飛沫核可隨風傳到9km或更遠的地方，使健康豬群受到感染。被污染的飼料、或帶病毒的鼠、羊等動物也可傳播。
　　3 臨床癥狀
　　病豬的臨床癥狀和病程隨年齡不同而有很大差異。哺乳仔豬最為敏感，15日齡以內的仔豬常表現為最急性型，病程不超過72h，死亡率100%，主要表現為體溫升高、拉稀、發抖、運動不協調、流涎、頸部肌肉僵硬、四肢劃水樣運動，最后昏迷死亡。育肥豬則大多數伴有體溫升高，呼吸困難，一般不發生死亡，耐過后呈長朗隱性感染帶毒或排毒。成年豬常不呈現可見臨床癥狀或僅表現為輕微體溫升高，一般不發生死亡。母豬妊娠初期，可在感染后的20天左右發生流產，在妊娠后期，經常發生死胎和木乃伊，或者產出弱胎和死胎。
　　4 診斷
　　4.1 病毒分離和鑒定采取腦組織、扁桃體，用PBS制成10%懸液或鼻咽洗液接種豬、牛腎細胞或雞胚成纖維細胞，于18-96h出現病變，有病變的細胞用H·E染色，鏡檢可看到嗜酸性核內包涵體。
　　4.2 兔體接種試驗上述懸液經2000r/min離心1Omin，取上清液1~2ml經腹側皮下或肌肉接種家兔，通常在36-48h后注射部位出現劇癢，病兔啃咬注射部位皮膚，皮膚脫毛、破皮和出血，繼之四肢麻痹，體溫下降，臥地不起，最后角弓反張，抽搐死亡。
　　4.3 血清學診斷
　　4.3.1 中和試驗(NT) NT有較高靈敏度，是一種常用的診斷方法。將標準病毒株與連續倍比稀釋的等量血清混勻后，37℃中和lh，接種在96孔微量培養板上的單層豬腎繼代細胞(PK-l5)或雞胚成纖維細胞，置37℃，5%CO2培養觀察CPE，以能完全中和試驗病毒的血清最高稀釋度的倒數為該血清的中和效價，中和效價大于或等于1:2的判為陽性。
　　4.3.2 酶聯免疫吸附試驗(ELISA) 程由銓等應用單克隆抗體介導的固相微球直接ELISA檢測感染，小白鼠額下腺、耳下腺混合物、肝、脾、肺、腎等材料，PRV的陽性檢出率為98%。黃駿明等用過氧化物酶標記的葡萄球菌蛋白A建立的Dot-ELISA對豬血清PRV抗體具有特異強、靈敏度高的優點，與血清中和試驗比較，Dot-ELISA陽性檢出率為28.19%(53/188)、NT陽性檢出率為20.74%(39/188)。
　　4.3.3 免疫熒光抗體試驗(FA) 程由銓等[10]建立了檢測病料組織中PRV間接熒光抗體試驗，并和病毒分離(VI)作了比較，對肺和扁桃體中PRV抗原檢出率分別為FA86%和92%，V194%和88%。黃駿明等建立了直接FA技術檢測PRV，對病豬活體取鼻咽試子涂片，對病死豬取扁桃體、三叉神經節、腦、脊髓和鼻粘膜涂片，檢出率高達95%以上。
　　4.3.4 核酸探針檢測技術郭萬栓等用斑點雜交法應用32P標記PRV全基因組DNA和重組質粒作探針檢測細胞培養物中的PRV一DNA，均能檢測lOpg的PRV一DNA，且有較高特異性。魏偉等用光敏生物素標記PRV特異性糖蛋白GP50克隆重組顆粒PUP作為探針，檢測實驗感染乳豬15頭份，證明通過PCR和分子克隆技術制備的PRV特異性糖蛋白基因片段的光敏生物探針，能有效地用于檢測偽狂犬病。
　　4.3.5 PCR技術冉多良等，石建平等，周復春等，冉智光等先后應用PCR技術對PRV進行基因擴增，均獲得了特異敏感的結果。
　　5 防治
　　目前尚無治療PR的有效藥物。對PRV控制除常規隔離、消毒、控制人員流動以外，疫苗接種是防止PR發生流行的重要措施。Lens[3]報道用DNA重組技術研制的低毒力PR疫苗進行田間免疫，安全有效，應用該疫苗接種的豬再發生接獨感染。目前國內主要應用滅活苗和弱毒苗預防PR，具有良好的免疫效果。滅活苗和弱毒苗只能降低接種豬的發病率和死亡率，但不能阻止帶毒豬排毒。PR一旦傳入豬場就很難根除，在發生過PR的豬場，停止使用疫苗后又會引起本病的發生。因此，在疫區進行疫苗接種外，非疫區應加強對引進豬的檢疫，隔離飼養，搞好圈舍衛生，從而控制該病的發生和傳播

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