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畜牧人

標題: 光合細菌培養基配方 [打印本頁]

作者: zm19862009 時間: 2010-10-13 09:04
標題: 光合細菌培養基配方
　　光合細菌培養基配方
　　光合細菌是兼性厭氧的，不同的光合細菌用的培養基不一樣我現在就在做關于光合細菌的問題，這幾中細菌都是常見的細菌，培養基在許多微生物上后面都有，光合細菌的富集培養基是：
　　NH4Cl0.1g NaHCO3 0.1g KH2PO4 0.02g CH3COONa 0.1-0.5g MgSO4.7HO2 0.02g
　　NaCl0.05-0.2g 三生長因子1ml　微量元素溶液1ml　蒸餾水97ml　PH7.0
　　生長培養基加氮源(谷氨酸鈉)和碳源(乙酸.丙酸.丁酸鹽等)及可.其他菌的分離只要選擇不同的培養基就可以選擇分離啊
　　光合細菌富集純化詳見網易網盤
　　光合細菌培養基配方
　　氯化氨1克，磷酸氫二鉀0.5克，氯化鎂0.2克，氯化鈉2克，酵母膏0.1克，水900毫升。
　　各成份溶解后15磅滅菌20分鐘，然后無菌的加入過濾的碳酸氫鈉5.0克/50毫升水;50毫升過濾的乙醇。用過濾的0.1N磷酸調PH=7.0即可。
　　響應面設計法優化光合細菌培養基配方。培養基成分中醋酸鈉和蛋白胨對于光合細菌的生長影響最為顯著，最優培養基配方為：醋酸鈉1.145g/L、蛋白胨0.055g/L、碳酸氫鈉0.6g/L、硫代硫酸鈉0.4g/L、氯化鈉0.3g/L、硫酸鎂0.1g/L、磷酸二氫鉀0.05g/L。在此條件下，光合細菌生長最為良好，經過5d培養以后，培養液OD600可以達到0.5以上
　　光合細菌(含生產工藝)
　　優良的光合細菌菌種的外觀質量是啥樣?
　　一般優良的光合細菌菌種和產品的外觀質量有以下幾點：
　　1、外觀上看比較均勻，基本無上下分層。相反，市場上有許多光合細菌是上下分層的，包括我中心初期的產品也是這樣，上層比較清淡，下層則比較深厚，上層顏色淺，下層顏色深，最底層可能還會有一層黑黑的沉淀。
　　而優秀的光合細菌菌種和產品，上下都是比較均勻的，沒有較明顯的分層，顏色比較均勻，外觀看起來也悅目。(當然，除了培養基溶解時，會與硬水中的重金屬離子反應產生的絮裝沉淀除外)
　　這種上下無分層，顏色均勻，不是靠加懸浮劑，或增稠劑而造成的，而是自然培養出來的，不加任何修飾而成的。少數地方，由于水質的原因，可能會產生稍稍的差別。
　　2、沒有粘壁現象。很多市場上的產品都有粘壁現象，即在容器的壁上形成一層紅紫色的顏色層，就象是油漆一樣，洗不掉，抹不去。這主要是在培養過程中形成的，也有在保存過程中形成的。
　　優秀的光合細菌菌種和產品，應該是沒有一絲一毫的粘壁現象。所以外觀上看起來質量也更好。
　　3、顏色的深度比較深。根據國家質量標準，可以用721分光光度計，測量A660nm處的吸光值，如果大于1.5，則說明，濃度一般都在30億/毫升以上，好的光合細菌菌種和產品都在1.5以上。
　　4、顏色鮮艷無雜色。優秀的菌種和產品，不僅顏色深，而且，比較鮮艷，沒有雜色，比如是大紅色，血紅色，或是深紫色，看起來是很悅目的，沒有不良的雜色，或是暗暗的顏色。
　　5、保存期限長。可以保存夏天3月以上，冬天6月以上。在期限內外觀基本無變化。保持80%以上的活力。
　　6、培養周期短，接種量少。好的菌種，接種量在10--20%即可，我中心推崇20%接種量，培養條件好的，可只用10%接種量，都可以在3--5天內培養好(條件是用白熾燈培養，溫度在30--37度)，或在7天培養好(條件是用太陽光照培養，陽光充足時，僅是白天照射培養，液體溫度在30--38度，晚上不培養)。
　　而市場上很多菌種要50%以上接種量，當然，在有條件情況下，用大接種量是有好處的，在有條件的情況下，我中心也推薦您用30%的接種量，能更穩妥，更快地培養成功。
　　7、基本不存在雜菌污染在保證清潔培養的情況下，一般不存在雜菌污染的情況，當然，這也與培養基配方技術有一定關系。
　　8、可以無限制地循環培養下去。不僅可以無限制地循環培養下去，而且，性能不變，質量不減。當然，這也與培養基配方技術有一定關系。
　　小規模光合細菌燈光培養中用60--100瓦白熾燈較好
　　在實驗室用紙箱法培養光合細菌時，要用到白熾燈(注意，不能用日光燈，日光燈的光波不適合培養光合細菌，所以日光燈是沒有用的)，以前做的試驗由于是用 500*500*350mm的小紙箱，所以有40瓦的白熾燈就可以維持箱內溫度在35℃左右，甚至到40℃，用40瓦的白熾燈培養，一般需要5天以上才能長得非常深紅色。
　　后來用到了700*700mm的大紙箱，我們才改用60瓦的白熾燈，發現培養的時間可以大大縮短了，而且進入冬季后，紙箱中的溫度只能維持到25℃，我們發現，即使是在25℃的箱內溫度下，也只要培養4天左右就長得非常深紅色了，所以我們分析，可能是60瓦以上的白熾燈的光波更加適合于光合細菌的生長繁殖，所以我們建議各位用戶，改用60瓦的白熾燈，可以大大提高培養的成功率，和大大縮短培養的時間。
　　如果是夏天，若用60瓦的白熾燈太熱，可以在紙箱上戮大量孔洞，用于散熱，維持箱內溫度在35度左右。
　　光合細菌發生劑的用法(即光合細菌的生產工藝)
　　一、光合細菌生長所需的營養條件用“光合細菌發生劑”生產的終端產品：光合細菌液，PSB細胞濃度達到30--100億/毫升，生產成本只要0.30元/公斤，而使用價值可達到2元/公斤，投入產出比達到1：6--12以上。做成的液體產品，密封保存在通氣干燥處，可保質達1年以上。
　　二、光合細菌生長所需環境條件有了營養全面的“光合細菌發生劑”，還必須有一個良好的培養環境條件，才能生產出優質產品出來。PSB所需的環境條件有以下幾個：
　　1：培養介質，含雜菌較少的清潔淡水。地下水、河水、海水等，硬度低的水更好(如河水)，選取水源時，最好先做幾種水源的對比試驗，使用哪里的水源在培養試驗中最先變成紅色(生長良好)，就選用哪里的水作為生產用水。自來水取自河水，硬度低，雜菌少，只要菌種能耐漂白粉殺菌劑，用自來水比其它水反而更好更快。您不妨做一次自來水的試驗。 2：酸堿度，PH值在8~8.5為最好，光合細菌的適應PH范圍在6~10之間。
　　3：溫度，以28~36℃為最適生長溫度，其適應的生長溫度范圍為15~41℃。
　　4：光照強度，以3000~4000勒克斯(LX)為最佳，即每25公斤菌液需要用相當于60瓦左右的白熾燈作光源，而太陽光照為最好且不要成本。宜春專利中心提供光合細菌發生劑。三、光合細菌成品的生產
　　1、培養液的配制將購得的我中心的光合細菌發生劑取一公斤，放入一個干凈的容器中，加入100公斤水，攪拌均勻，直到發生劑(培養基)溶化為止。若容器不夠大，則可以少配一點。
　　注意事項：水源一定要選擇好，含菌量較低的清潔淡水、海水或加粗食鹽的淡水。從經濟、實用的角度考慮，地下水(井水)含菌量低，為最佳水源，另外，若當地自來水含氯較低，也可用，效果很好;清潔的地表水也可使用;含氯量較高的自來水應敞口放置兩三天或調PH值至偏堿后使用;蒸餾水及純凈水固然很好，但成本太高，可用于提純菌種。
　　選擇容器：少量生產可用透明度較高的白色或透明塑料桶、玻璃容器。大量生產可用水泥池、水泥船，也可臨時開挖土池，墊上雙層塑料膜防漏防渾濁，培養液的深度為30公分最佳。
　　2、培養方式有以下三種：
　　(1)做小試驗培養的方法
　　容器為：1.25升的飲料瓶，即小規模生產方法，由于飲料瓶的量小，瓶子透明度好，又密封，所以培養環境好，需要的接種量也少，比較簡單。
　　設備為：光照箱，用一個大的紙箱，放一個40瓦的白熾燈懸掛在箱子的空中(注意防火)，紙箱內壁四周，堆放著已裝好了培養液并接了種的飲料瓶，這樣，既達到了保溫到25—40度的效果，又達到了光照的效果。較大的箱子要用60瓦的白熾燈，一般一個箱子，可放這種飲料瓶8個以上，即一次可生產約10公斤/箱。燈泡與瓶子的距離不超過20厘米。夏天，可撤去紙箱，以防溫度過高，春秋秋天，也要在紙箱四周鉆孔以散熱。
　　操作規程如下：
　　配料：培養液為1%濃度的發生劑溶液，接種量為20%，注意水源必須一干凈衛生，最好用地下水，自來水可以試用一下，第一次做試驗時，要多選擇幾種水源同時做，以確定哪種水源最好，最先轉成紅色的水源最好，可確定為今后的生產用水。
　　培養：在箱子內，打開白熾燈，照幾天即可，一般可達到溫度在35度，控制在30--40度之內，所以要密切注意溫度不要過高，第一次培養可能需要5天以上，一定要注意，每天要搖晃兩次，這很重要，菌種適應了貴地的水源后，一般只需要2天即可長成深紅色。
　　培養成熟標準：以培養液長成深紅色為準，這時一般成品的光合細菌濃度可達到30--100億/毫升。 (2)用塑料桶進行大規模生產或用培養蝦苗用的塑料袋來做效果更好。一袋20公斤的樣子。
　　例如容器選用25公斤裝的大塑料桶，由于條件不如做小試驗的培養方法好，所以接種量要達到至少20%以上的量。即往大塑料桶中加入22.5公斤的配制好的培養液(即1%的培養基溶液)，再加入2.5公斤的菌種液，搖勻。
　　①利用太陽能培養：把上述塑料桶放到太陽底下曬即可，只要注意：夏季氣溫過高，若用太陽作為光照能源，則應采取部分遮陽(用黑色的遮陽塑料網)，通風的降溫措施，以防光合細菌快速老化死亡;冬天則氣溫低，則要采取搭建一個塑料暖棚增溫的方法，把塑料桶放入暖棚內曬太陽即可;春秋季則可直接放在太陽底下不用管即可。總之要使之溫度在25度--36度之間最好。過些日子它自然會長成深紅色的成品。經方法即是懶漢培養工藝法， ②利用白熾燈作為光能生產：在一個容器內懸掛一個白熾燈，容器內裝的培養液深度不得大于30公分，燈泡與液面距離不得大于20公分。
　　(3)用塑料膜做的池子來大規模生產
　　您還可以這樣利用太陽能大規模培養(以培養2噸菌液為例)：
　　選擇陽光充足的地方，開挖一土池(長5米、寬1.8米、深0.4米)，有現成的水泥池更好。墊上塑料薄膜，然后再鋪上桶狀塑料薄膜，并將其一端密封，從另一端加入1.8噸配制好的培養液，和0.2噸的菌種，一共2噸，排盡薄膜中空氣后，再將該端密封。保持適當的溫度，冬天如果溫度過低，搭建透明塑料薄膜棚增溫。這樣，幾天后，菌液培養成熟。長成深紅色。
　　也可以在室外挖一個土坑，深40厘米，墊上一層塑料薄膜，再倒入培養液，液面上再蓋一層塑料薄膜，以免與大量空氣接觸，造成污染雜菌，再用太陽照射培養成熟，天氣冷就搭塑料棚升溫。當然這一套裝置也可放于室內，用每半平方料一個60瓦白熾燈照射，燈與液面距離小于25厘米，溫度不夠，也要搭一個室內塑料棚，棚內放一爐火即可保溫到 30度以上。
　　四、光合細菌固態產品的生產將高濃度PSB菌液用蛭石粉或沸石粉吸附后，陰干或風干粉碎即得粉狀固體PSB產品。可包裝出廠，便于運輸和售賣。也更象一個產品了。一般售價可達到2元/公斤以上，光合細菌︰沸石粉=1︰3~4。也可用其它載體來做干燥吸附劑，如草炭、硅藻土等。

作者: 追逐 時間: 2010-10-13 09:13
先頂再看！

作者: amypx 時間: 2010-10-13 09:15
學習一下

作者: qzzxd 時間: 2010-10-13 09:53
路過,學習了

作者: biogay 時間: 2010-10-28 02:06
這個配方沒有任何實用之處！！！借鑒一下還可以

作者: 劉增茂 時間: 2010-10-28 06:36
路過,學習了

歡迎光臨畜牧人 (http://www.ylikhb.com/)

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