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畜牧人

標題: 飼料用抗氧化單制劑及飼料中抗氧化劑的檢驗 [打印本頁]

作者: 007畜牧 時間: 2013-10-16 10:13
標題: 飼料用抗氧化單制劑及飼料中抗氧化劑的檢驗
　 (, 下載次數: 15)

　(一)飼料用乙氧基喹啉的檢驗
　　1．中國醫藥行業標準法
　　此法適用于以對氨基苯乙醚和丙酮為主要原料合成的乙氧基喹啉(ethoxyquinline)。在飼料工業中，用作抗氧化添加劑。化學名稱6-乙氧基-1，2-二氫-2，2，4-三甲基喹啉(6-ethoxy-1，2-dihydro-2，2，4-trimethyl
　　quinoline)，簡稱乙氧喹、乙氧基喹等。
　　(1)鑒別：黃褐色或褐色黏稠液體，稍有特殊氣味。易溶于丙酮、異丙醇、乙醚、三氯甲烷、石油醚及正己烷，幾乎不溶于水。遇空氣或光顏色逐漸變深，但不影響使用效果。
　　(2)測定
　　①樣液制備：稱取試樣約0.2g(精確至0.000 2g)于干燥具塞的三角瓶中，加30ml冰乙酸，使之溶解，另加lml乙酸酐。
　　②滴定：加1滴結晶紫指示液，用高氯酸標準滴定溶液(0.1mol／L)滴定至綠色，并將滴定結果用空白試驗校正。
　　③分析結果計算：乙氧基喹啉含量以質量百分數表示，由下式給出：
　　X2=((V1-V2)×c×0.2173×100％)/m3
　　式中：V1--試樣消耗高氯酸標準滴定溶液的體積(m1)；
　　v2--空白試驗消耗高氯酸標準溶液的體積(m1)；
　　c--高氯酸標準滴定溶液的實際濃度(mol／L)；
　　m3--樣品的質量(g)；
　　0.217 3--與lml高氯酸標準滴定溶液[c(HClO4)=0.100 0mol／L]相當的C14H19NO
　　的質量(g)。
　　所得結果應表示至1位小數(參見中華人民共和國醫藥行業標準 YY 0039-1991)。
　　2．美國飼料原料協會法
　　(1)原理：用石油醚將飼料樣品中的乙氧喹及熒光法測定的物質提取，過濾；然后通過氧化鋁柱層分離，洗脫乙氧喹，用熒光法測定。
　　(2)測定
　　①乙腈：熒光讀數小于2，如大于2則需重蒸餾。
　　②乙氧喹標準系列(1h內新配)：配制0.5μg／ml、1μg／ml、2.5μg／ml的乙氧喹乙腈溶液。
　　③熒光儀：預熱1.5h，用2μg ／ml硫酸喹寧校正儀器。
　　④用乙腈將儀器調零。
　　⑤濾光片：透過410～580nm。
　　(3)注意事項：含有乙氧喹的洗脫液，不宜使用太多；在旋轉真空蒸發器上蒸干溶劑；避光操作。
　　(二)丁基羥基茴香醚(BHA)、二丁基羥基甲酚(BHT)的鑒別
　　1．BHA的鑒別
　　在試樣的乙醇溶液中加2m112％四硼酸鈉溶液及2，6-二氯醌亞胺結晶數粒，應出現藍色。取0.5％試樣乙醇(50％)溶液5ml，加2ml三氯化鐵溶液和2ml二
　　2，2-聯吡啶溶液，應出現紅色。
　　2．BHT的鑒別
　　取5ml試樣，加入2.5ml乙醇，溶解后加入25ml水稀釋，混勻，加2ml鄰聯二茴香胺溶液，搖勻加入0.8ml亞硝酸鈉溶液混合，放置5min，加入0.5ml三氯甲烷，劇烈振搖半分鐘放置分層，三氯甲烷層應呈品紅色或紅色。
　　(三)飼料中丁基羥基茴香醚(BHA)、二丁基羥基甲酚(BHT)和乙氧喹(EQ)的測定
　　1．原理樣品中BHA、BHT、EQ用正己烷提取，離心分離后(必要時凈化處理)，取上清液在氣相色譜儀、FID定量測定。
　　2．測定
　　(1)提取：稱取2g試樣于l0ml刻度試管中，加入少許無水硫酸鈉，加入5.0ml正己烷，加塞，在微型混合器上混合0.5min，在超聲波處理槽內超聲提取15min。以4000rpm離心2min，上清液為待測溶液。
　　(2)凈化：如遇干擾待測組分的樣品，需作氟羅里硅土柱凈化處理，待測。
　　(3)分別取系列混合標準溶液和待測溶液，在氣相色譜儀進行定量測定BHA、BHT、EQ(參見中華人民共和國國家標準GB／T17814-1999)。
　　(四)出口魚粉中乙氧基喹含量的測定
　　1．原理樣品用甲醇和石油醚提取后，用熒光分光光度計測熒光強度，與標準比較
　　定量。本方法適用于出口魚粉中乙氧基喹(ethoxyquin)的測定。
　　2．測定
　　(1)乙氧基喹標準溶液：精確稱取l00mg乙氧摹喹于燒杯中，然后移入100ml容量瓶中，用石油醚溶解后并稀釋至l00ml，此液每毫升相當lmg乙氧基喹。使用時，用石油醚制備成每毫升相當于0.5mg、lmg、1.5mg、2mg、2.5mg的乙氧基喹標準系列溶液。
　　(2)硫酸奎寧參比溶液：稱取0.1g分析純硫酸喹寧于1000ml
　　0.5mol／L的硫酸溶液中，吸取10ml此溶液，用0.05mol／L硫酸溶液稀釋至1000ml，此溶液每毫升相當于lμg硫酸奎寧，作校正熒光計用。
　　(3)樣品處理：稱取10g樣品于三角燒瓶中，加入50ml甲醇，搖動15min后，將樣液過濾于250m1分液漏斗中，再用30ml甲醇，分2次洗滌三角瓶，濾液合并于分液漏斗中，加入100ml水，搖勻后，加人50ml石油醚，振搖lmin，靜置分層。若發現乳化現象，可加入少量氯化鈉，以使乳化消失。將下層水溶液移人另一個250m1分液漏斗中，再用石油醚提取2次，每次加入25ml石油醚，合并石油醚提取液，加入50ml水洗滌石油醚，將石油醚通過無水硫酸鈉過濾于100ml容量瓶中，并稀釋至刻度，作樣品測定液。
　　(4)步驟：將樣品測定液、試劑空白液以及每毫升相當于0μg、0.5μg、1μg、1.5μg、2μg、2.5μg的乙氧基喹標準系列，移入熒光分光光度計的石英杯中。以狹縫為9mm、365nm為激發光波長，以420～450nm波長進行熒光掃描。測定前用石油醚調節熒光分光計零點，再用硫酸奎寧液調節為100，然后進行樣品液試劑空白和標準液的測定，所得熒光強度與標準乙氧基喹的熒光強度系列繪制標準曲線相比較，求出樣品中乙氧基喹的含量(參見中華人民共和國農業行業標準lNY／T 46002-1987)。

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