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畜牧人

標題: 【筆記】豬瘟之診斷 [打印本頁]

作者: 畜牧人小李    時間: 2016-10-20 09:18
標題: 【筆記】豬瘟之診斷

豬瘟之診斷
鐘明華 研究員 臺灣動物研究所

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一、豬瘟及豬瘟病毒
  豬瘟是高度傳染性敗血癥,以全身性出血為主征,感染率與死亡率均高達95-100%。豬瘟只有一個血清型,豬和野豬是唯一的自然宿主,也是最重要的感染源。豬瘟感染豬及其分泌物排泄物為豬瘟主要傳染源。口水、鼻液、眼屎、糞尿、精液等都有病毒。
  豬瘟病毒為RNA病毒,有封套,其RNA具有感染力。病毒核酸基因全長12.3Kb。
二、豬瘟診斷流程:

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臨床癥狀
  豬瘟發生初期,豬群內往往只有少數豬只呈現癥狀。感染豬最初呈現精神不振,食欲降低,行動遲鈍,體溫顯著升高(通常在41℃左右)等現象,血液中白血球量亦隨著體溫上升而減少。病癥早期,豬眼部因結膜炎而有大量分泌物,而后是眼瞼完全黏著。
  患病豬呈高熱,畏寒。小豬喜聚集成堆,保育后期豬只,臨床呈現消瘦,被毛粗亂,并推擠在一起。
  肉眼病變,病豬皮膚潮紅,皮下點狀及斑狀出血。
  宏觀病變,脾臟梗塞,腎臟結節,淋巴結皮下出血,胸腺萎縮,直腸、盲腸潰瘍。
SPF豬人工感染豬瘟病毒試驗:
  臨床癥狀,感染早期下痢,短暫發熱;被毛粗亂;臨床病理學:肝功能異常;
  肉眼病變:淋巴結腫大,周邊出血;腎臟出血;肝細胞腫大,蒼白;腸粘膜潮紅;心肌蒼白。
  組織病變,非化膿性腦膜炎;小腸粘膜充血、出血;肝細胞腫大變性;間質性腎炎;心肌炎。
實驗室診斷
  血液學檢查:白細胞減少,病毒血癥,抗體檢測。
  冷凍切片熒光抗體染色:扁桃體、脾臟、淋巴結、腸管、腦、皮膚、毛囊、舌頭。
  抗體監測:血清中和抗體檢測,酶聯免疫吸附實驗。
  病毒分離:初代仔豬睪丸細胞培養,豬腎細胞培養。
  病毒鑒定:間接熒光標示抗體染色(IFA),間接過氧化氫酵素標示抗體染色(IPMA),RT-PCR,核酸測序及DNA晶片技術。
三、豬瘟病毒區別鑒定
  最后鐘研究員闡述了當前豬瘟病毒鑒定及診斷的主流技術為RT-PCR,但需要區分疫苗毒及野毒。如利用RT-PCR技術區別診斷LPC疫苗及豬瘟野毒。在豬瘟診斷中,需要注意一是:為了避免RT-PCR反應的誤判,要設計敏感及特殊的引物,RT-PCR反應太過敏感,特異性不足的引物可與疫苗及野外毒株反應,造成混淆而誤判;二是:避免形態學肉眼病理之誤判,因為其他疾病有類似豬瘟之肉眼病灶。
  另外談到了利用基因晶片技術進行豬瘟的診斷,該技術可區分豬瘟疫苗毒,野毒。
  當前豬瘟依然是危害我國養豬業的最重要的疫病之一,最近豬瘟疾病的發生呈現上升趨勢,是規模化豬場優先防控的主要疾病之一。

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  當前豬場豬瘟的防控壓力依然嚴峻,具有6大特點:流行范圍廣;散發流行;發病年齡小,成年豬帶毒現象嚴重;非典型癥狀和繁殖障礙型豬瘟增多;混合感染嚴重;免疫失敗現象嚴重等特點。那么,為了更好的防控豬瘟,精準、及時的實驗室診斷尤為重要,主要采用RT-PCR檢測技術診斷方法,但存在誤判的風險,需要設計更加敏感的診斷方法(如臍帶血、扁桃體檢測技術),結合臨床癥狀進行綜合判斷和分析。
  關于豬瘟防控,最好的措施是實現豬瘟的凈化。鑒于發達國家成功消滅豬瘟的方法,結合國內實際情況,因地制宜制定適合國內的豬瘟凈化方案,再配合高通量、精準的豬瘟診斷技術(如臍帶血、扁桃體檢測技術),最終能夠成功實現豬瘟的凈化。






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