生物活性肽對雞免疫功能的影響

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生物活性肽對雞免疫功能的影響
    摘要：近年來，人們對生物活性肽有了新的認識，生物活性肽不僅能夠促進動物生長發育，而且對畜禽的免疫機能也有一定的影響，其對畜禽免疫機能的影響越來越受到人們的重視.活性肽分布廣泛，動物的乳汁、胸腺、脾臟、胰腺等均含有豐富的活性肽。本文僅就從胸腺提取的胸腺肽和從脾臟提取的脾臟活性肽對雞的免疫機能的影響作一綜述。
    關鍵詞：生物活性肽；胸腺肽；脾臟活性肽；免疫機能；雞
    生物活性肽（Bioactive Peptide，BAP）是一類分子量較小，在構象上較松散，具有特殊生物活性的肽類物質。活性肽分布廣泛，例如動物的乳汁、胸腺、脾臟、胰腺等均含有豐富的活性肽。
    許多研究表明，乳中含有大量自然存在的生物活性肽[1]如胰島素樣生長因子（IGFs）、表皮生長因子（EGF）、轉化生長因子（TGF）和胰島素，IGFs是一類刺激生長發育和細胞分化的調節因子，包括IGFΙ和IGFⅡ。EGF是一種強有力的細胞分裂促進因子，能促進多種類型的細胞分裂和增殖。TGF包括TGFα和TGFβ兩種，TGFα對皮膚厚度、胃腸道細胞、血管、免疫和內分泌系統均有明顯的影響，TGFβ對細胞的增殖、發育和轉化都有一定的調節作用。胰島素主要是促進糖原蛋白和脂肪合成，可促進多種類型細胞的有絲分裂，并與血小板源生長因子、表皮生長因子協同作用。同時也有研究表明，從動物脾臟提取的脾臟活性肽和從胸腺提取的胸腺肽都具有促進動物生長、調節動物免疫機能的作用。
    但是，因由于Dogman的蛋白質必須被消化成游離氨基酸（FAA）才能被吸收的觀點[2]，肽的研究一直處于停滯狀態,直到80年代，肽的觀點才開始為人們所接受和重視。Dogman的這一學說也限制了活性肽作為添加劑在畜牧業上的應用。新近的研究表明，小肽能夠被完整地吸收而進入血液循環。小肽的吸收機制與游離氨基酸不同，而且具有轉運快、耗能低和不易飽和的特點。機體存在獨立于氨基酸的肽的轉運系統。但是目前對生物活性肽的研究和其在動物飼養實踐中的應用還有很大距離，對動物免疫機能的影響如何、在體內吸收和轉運的確切機制如何等，這些問題還需我們做大量的工作。盡管如此，肽的研究及應用依然具有廣闊的前景，下面僅就胸腺肽及脾臟活性肽對雞免疫機能的影響加以討論。
   
1 胸腺肽對雞的免疫機能的影響
    胸腺是家禽體內最早形成的淋巴器官，胸腺組織結構在尚未完全形成前,個別淋巴細胞已具備一定程度的免疫活性，并行使一定的免疫功能，而胸腺組織的完全發育，則為淋巴細胞行使其免疫功能提供了較充分的組織基礎[3]。
    胸腺除了提供T淋巴細胞發育所需的微環境外，還分泌胸腺肽，影響T細胞的分化和成熟[4]。早在1966年，就有人發現胸腺具有免疫功能，以后大量研究表明胸腺因子、胸腺素等能提高畜禽機體的免疫反應，增強淋巴細胞分化過程,快速誘導分化抗原在淋巴細胞表面上表達,通過研究胸腺制劑對MD的免疫增強作用的試驗,表明胸腺制劑對雛雞有明顯的免疫增強效果,其結果優于單獨應用MD疫苗,是能提高雞馬立克氏免疫力的比較理想的免疫劑[5]。
    禽類的淋巴結發育不良，其T淋巴細胞來自胸腺。T淋巴細胞的功能是通過生物活性分子如巨噬細胞移動抑制因子和淋巴細胞毒素而表現出細胞免疫現象,在腫瘤免疫上認為T淋巴細胞占有重要作用。酸性-α-醋酸奈酯酶（ANAE）染色法是一種簡便易行的T淋巴細胞組織化學標記法。ANAE陽性細胞代表靜止、成熟的T淋巴細胞，通過向試驗組雞中加入胸腺制劑，T淋巴細胞活性明顯升高，表明胸腺制劑能有效地促進T淋巴細胞的誘導，協同免疫刺激作用。Murthy[6]也認為胸腺肽可提高外周血T淋巴細胞百分率。

Pridbailo[7]報道，胸腺制劑給雞注射或氣霧，可促進雞的生長。有實驗結果表明，在雛雞日糧中添加一定量的胸腺肽(適宜添加量為1.328～2.684mg/只·天)可調節雞的內分泌活動，提高其機體免疫功能，促進其生長發育[8]。關于胸腺肽促進動物增重可能源于以下兩個方面:①胸腺肽可提高動物機體的免疫功能，利于維持內環境的穩定；②胸腺肽調節機體內分泌系統的功能，從而促進增重,可使血漿中GH、T3、T4水平升高，而有報導，GH、T3、T4可使血液中T淋巴細胞總數增加。有研究報導,給雛雞注射胸腺肽，對γ-Ig有明顯增加作用[9]。也有研究報道，給雛雞注射胸腺肽，T淋巴細胞E花環形成實驗差異顯著，白細胞總數增加顯著，γ-Ig差異顯著，法氏囊比重差異顯著[10]。這表明，胸腺肽能夠增強雛雞的免疫機能。
    現已人工合成了TP-5（胸腺肽活性片段）。TP-5(Thymopeptin)是胸腺生成素Ⅱ第32～36位的氨基酸片段。其氨基酸序列為H·Arg·Lys·Asp·Val·Tyr·OH,該五肽仍保留母肽的生物活性，能選擇性誘導T淋巴細胞系統早期分化，使類風濕關節炎患者E玫瑰花形成細胞數恢復正常。巨噬細胞既是免疫效應細胞又是免疫調節細胞,其吞噬功能常作為藥物影響特異性和非特異性免疫的一個重要指標,在最適濃度下，TP-5使Et-RFC%提高了79%，Ea-RFC%提高了19%[11]。提示TP-5對T淋巴細胞有明顯選擇性，這與TP-5通過誘導不同功能的T淋巴細胞成熟而發揮其細胞免疫功能的結論相符。自Siegel[12]等人提出“紅細胞免疫系統”這一概念后，紅細胞在免疫系統中的作用越來越受到人們的重視。紅細胞在清除免疫復合物及致病病原中起著重要作用，能激活白細胞的免疫功能，使B淋巴細胞生長因子和免疫球蛋白增多。TP-5使判斷紅細胞免疫功能的兩項指標均處于較高狀態，說明紅細胞免疫系統被激活。免疫系統的各種細胞能夠相互激活和制約，維持一個最佳狀態，TP-5作為一種具有激素活性的物質，對免疫系統乃至整個機體的影響是復雜的。


從60年代開始,已先后有許多學者開始分離提純胸腺肽。到目前為止，已報道的胸腺肽有二十幾種。胸腺肽作為一種免疫因子已應用于醫學臨床，在抗感染、免疫缺乏癥的治療上獲得可喜成果[4]。
   
2 脾臟活性肽對雞免疫機能的影響
    脾臟轉移因子也稱脾臟活性肽(STF)是一種可透析的白細胞浸出物，是T淋巴細胞釋放的一種能轉移致敏信息的物質，它能夠特異地將供體的細胞免疫功能轉移給受體,從而增強受體的免疫功能。轉移因子的名稱也由此而來。目前,對其作用機制仍然不夠了解，對其結構也未完全弄清，只知道它是一種既含氨基酸、活性肽，又含核苷酸的可透析的小分子物質。脾臟轉移因子最早發現于20世紀50年代，后來，國內外學者都對脾臟轉移因子進行了大量的研究，受試驗對象包括人體以及豬、牛、羊、兔和雞等動物。在獸醫臨床實驗性治療中TF對病毒性傳染病、真菌感染病、免疫缺陷等病的輔助治療，療效較顯著。
     脾臟轉移因子可增強粵黃雞免疫機能[13]。動物機體的特異性免疫包括細胞免疫和體液免疫，細胞免疫主要通過T淋巴細胞而實現，體液免疫主要通過B淋巴細胞而實現，并且有賴于T淋巴細胞的參與。胸腺與法氏囊是禽類的中樞免疫器官，來自骨髓的淋巴干細胞，分別在胸腺與法氏囊分化，發育成T、B淋巴細胞，在抗原信息的刺激下，T、B淋巴細胞被激活，轉變成淋巴細胞并遷移到外周淋巴器官（脾臟、淋巴結），經多次分裂增殖后，轉變為免疫活性淋巴細胞，從而發揮其免疫功能。因此，抗原信息的刺激與動物機體免疫功能的發揮有著直接的聯系。給粵黃雞注射一定濃度的STF能提高雞外周血液中的T淋巴細胞百分率，這表明轉移因子作為免疫信息的載體，具有增強受體免疫機能的作用。同時發現，在注射STF后，粵黃雞血液中ND抗體滴度升高，說明STF在提高受體的細胞免疫功能的同時，還能使受體的體液免疫功能得到加強。目前認為，轉移因子主要是通過T淋巴細胞調節機體的免疫機能，而B淋巴細胞在實現體液免疫機能的同時，也有T淋巴細胞的參與，因此，STF增強受體體液免疫機能的機制可能與此有關。
    脾臟轉移因子對粵黃雞的生長發育有促進作用[14]。動物機體的正常發育一般由T4、T3和GH協同調控而完成。GH促進組織生長，T4、T3主要促進器官、組織的分化，而且GH的促生長作用,需要有適量的T4、T3的存在。給雞注射STF后，8周齡時血液T4、GH水平顯著高于對照組.因此,脾臟轉移因子促進粵黃雞生長發育的內在機制與血液T4、GH水平的升高有關.由于動物體內的T3一部分由甲狀腺直接分泌，另一部分來源于T4。T4被血液帶至全身各組織器官后，在組織內5′-脫碘酶的作用下轉變為T3，并且在局部發揮生理作用，而且T3的半衰期（1～3d）比（6～7d）短，并且主要在組織內由T4轉變而來，因此，試驗中未觀察到血液T3水平出現顯著差異[14]。
     雞脾臟轉移因子可增強雛雞的免疫機能[15]。接受經口服或注射STF的3日齡雛雞，外周血液ANAE＋-T淋巴細胞百分率呈逐漸上升趨勢，至12日齡時，陽性T淋巴細胞百分率顯著高于對照組。這表明STF激活了與細胞免疫功能有關的T淋巴細胞，即由STF介導的雛雞細胞免疫功能明顯加強。一般轉移因子的作用是把免疫力轉移給明顯缺乏反應性的組織和器官，誘發特異性淋巴細胞增殖，改變T淋巴細胞的活性，調節細胞免疫，加強機體的免疫機能。同時還發現，口服和注射兩種途徑均有激發雛雞細胞免疫的效果，而且注射STF對細胞免疫功能的影響更明顯。受STF的影響，免疫器官脾及法氏囊相對濕重增加[12]，由此看來，STF對免疫器官（包括中樞和外周免疫器官）的影響，也是增強免疫機能的一個重要方面。
    有研究表明：雞STF對活疫苗和油乳劑滅活苗，不論是首免還是二次免疫，均具有協同作用。它不僅能促進雞淋巴細胞的轉化，提高機體的細胞免疫水平，還能夠顯著地提高免疫接種雞的體液免疫應答能力,產生較高滴度的抗體，并延長抗體高峰期，使之維持較長的時間，從而增強疫苗的免疫效果,提高機體免疫力和抗病能力。同時，疫苗與STF的聯合應用，能保證接種后及時產生足夠的保護抗體及細胞免疫能力，有效避免因單純應用疫苗而造成的免疫失敗問題具有重要意義。從此意義上說，STF是一種優秀的免疫增強劑[16]。
    綜上所述，從動物胸腺和脾臟提取的胸腺肽和脾臟活性肽均具有促進淋巴干細胞向T淋巴細胞分化和刺激T淋巴細胞增殖的作用,它們不僅能促進雞的生長，而且對其免疫機能也有明顯的促進作用。由于胸腺肽和脾臟活性肽均來源于動物體,不存在殘留問題，對動物無過敏及誘變反應,如能在此基礎上進一步研究其對家禽免疫機能的調節機制，將有可能研制出高效、安全、無殘留的新型免疫增強劑，這對畜禽業將有重大意義。