中藥對常見病原菌效果分析

apple12151007 · 發表于 2010-8-17 14:20:36

　　為了進一步驗證中草藥的抑菌和殺菌作用，為開發綠色藥品提供依據，在實驗室通過大黃、黃芩、黃柏、大青葉、西紅柿汁、羊膽汁對大腸桿菌等幾種病原菌進行了藥敏試驗，現將試驗過程及結果報告如下：
　　1 材料與方法
　　1.1試驗用菌種大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、鏈球菌、綠膿桿菌由河北農業大學微生物實驗室提供。
　　1.2藥品大黃、黃芩、黃柏、大青葉購于保定樂仁堂藥店;羊膽汁由保定第一肉聯廠提供;西紅柿從菜市場購得。
　　1.3培養基的制備除營養肉湯是按常規制備外，其他如營養瓊脂、SS瓊脂都為市售。無菌羊血清及脫纖綿羊血采自河北農業大學畜牧教學基地羊群。
　　1.4單味中藥的處理稱取大黃100克，切細磨碎，加5～6倍水，加熱煮沸30分鐘，過濾。藥渣再加同量水加熱煮沸30分鐘，過濾。將兩次濾液合并后，蒸發濃縮到250毫升備用。黃芩、黃柏、大青葉用同樣方法處理。
　　西紅柿汁的制作：將500克西紅柿洗凈，涼干，置于無菌操作臺上經紫外線燈照射1小時，然后在無菌操作臺內剝皮，切塊，放入無菌豆漿機中絞碎，再用無菌紗布過濾，收集濾液備用。
　　1.5細菌培養將大腸桿菌接種于營養肉湯，營養瓊脂和SS瓊脂;將金黃色葡萄球菌接種于含15%氯化鈉的營養肉湯和營養瓊脂平板;將鏈球菌接種于血清肉湯和血液瓊脂平板，綠膿桿菌接種于營養肉湯和營養瓊脂，然后置于37℃恒溫箱中培養24小時。
　　1.6藥敏片的制作
　　1.6.1紙片的制備將購買的新華1號定性濾紙用打孔器打成直徑6微米的圓形小紙片，然后每50小片放入一個清潔干燥的青霉素空瓶內，瓶口以單層牛皮紙包裹，15磅壓力20分鐘高壓滅菌后，放在37℃恒溫箱中數天，使完全干燥后備用。
　　1.6.2藥敏片的制備取大黃、黃芩、黃柏、大青葉的制備液，西紅柿汁及羊膽汁各0.25毫升分別滴加到裝有50片小紙片的青霉素小瓶內，并翻動紙片以使各紙片充分浸透藥液。在瓶上貼好標簽，并將瓶放入37℃恒溫箱內過夜，干燥后進行密封，待用。
　　1.7藥敏試驗在酒精燈旁，從培養各細菌的培養基上挑取本菌，然后接種于同一類型的培養基上，再用滅菌的小鑷子夾取已作好的各藥物的藥敏片，分別密貼于上述的培養基表面并作好標記。將貼好藥敏片的各細菌培養基放置于37℃恒溫箱內，放置時要使貼紙片的平板底部在下，培養24小時后觀察結果。
　　2 結果
　　由實驗結果可以看到，大黃、黃芩、黃柏、大青葉、西紅柿汁及羊膽汁對大腸桿菌、葡萄球菌、鏈球菌及綠膿桿菌都有不同程度的抑菌作用。它們對鏈球菌及綠膿桿菌基本表現為中度敏感。對于大腸桿菌，除黃芩、西紅柿汁表現為高敏感性外，其余都表現為中度敏感。其中，黃芩、西紅柿汁對大腸桿菌的抑菌圈直徑分別為16 微米、17微米，抑菌作用明顯。
　　3 討論
　　大黃、黃芩、黃柏、大青葉及羊膽汁具有抑菌、殺菌的作用,大黃含有大黃素和大黃酸，有較強的抗菌作用，能抑制金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、綠膿桿菌、鏈球菌等病原菌。據報道大黃+陳石灰(2∶1)配成撒布劑可治療化膿創;與地榆末配合調油，搽于局部，可治療火傷和燙傷。禽菌靈(大黃、穿心蓮、甘草、吳茱萸、苦參、白芷、板藍根)在獸醫臨床上使用效果良好。大黃、甘草湯也以治療仔、幼畜臍炎效果顯著而被廣泛應用。黃芩、黃柏分別可在加味三黃散及丹皮地黃湯中見到，起到清熱涼血、抗菌、止痢、消腫的功效。大青葉為十字花科一年生草本植物菘藍、蓼科一年生草本植物蓼藍、馬鞭草科落葉灌木路邊青及爵床科多年生灌木狀草本植物馬藍的葉、葉莖及根，其中以菘藍、蓼藍為最好。大青葉的主要有效成分是菘藍甙，有抗菌消炎，清熱解毒的功效。目前家畜臨床上常用于治療流感、腦炎、腮腺炎、肝炎等多種病毒性疾病及其他全身性感染疾病的化膿瘡。大青葉加工后所得色素稱為青黛，青黛提取物90%為靛玉紅，有涼血消斑、抗腫瘤、保肝、破壞白血病細胞、提高機體免疫力、抗菌的功能。羊膽汁可以提取膽色素，它含有硫酸化糖蛋白、β-葡萄糖醛酸酶、無機鹽類及解毒素，因而具有抗菌作用。
　　4 結論
　　大黃、黃芩、黃柏、大青葉、西紅柿汁及羊膽汁對大腸桿菌、葡萄球菌、鏈球菌及綠膿桿菌都有不同程度的抑菌作用。它們對鏈球菌及綠膿桿菌基本表現為中度敏感;對于大腸桿菌，除黃芩、西紅柿汁表現為高敏感性外，其余都表現為中度敏感;對于金黃色葡萄球菌，除大黃、黃芩、西紅柿汁表現為高敏感性外，其余也表現為中度敏感性。
　　河北省保定市畜牧水產局季曉明盧冬梅