“和胃保肝”(HWBG)對(duì)建鯉腸絨毛高度和肝細(xì)胞的影響

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　　“和胃保肝”(HWBG)對(duì)建鯉腸絨毛高度和肝細(xì)胞的影響

　　葉篤涵1 陳強(qiáng)2 (通訊作者) 李建生2 劉慶華2 陳炳華2 張照紅2 甘平旭3

　　(1.寧德市科技開發(fā)中心 福建寧德 352100;2.福建農(nóng)林大學(xué) 福建福州 350002;3.福州市畜牧站 福建福州 350005)

　　摘要：挑選個(gè)體大小、體重相近(規(guī)格：15g左右)的建鯉50尾，隨機(jī)分為5組，即基礎(chǔ)料組(空白組)、0.1%“HWBG”添加組、0.2%“HWBG”添加組、0.4%“HWBG”添加組和0.8%“HWBG”添加組，每組2個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10只建鯉。飼喂3周后取建鯉腸道和肝臟制成組織切片，測(cè)定腸絨毛高度。結(jié)果表明：0.1%、0.2%、0.4%、0.8%不同添加量的“HWBG”試驗(yàn)組的腸絨毛高度都極顯著地高于對(duì)照組(P<0.01)，各試驗(yàn)組的肝臟的胞漿密度比對(duì)照組的要大。結(jié)論：在建鯉中添加0.4%的“HWBG”的促進(jìn)建鯉腸絨毛增長和提高肝臟細(xì)胞漿密度效果最好。
　　關(guān)鍵詞：和胃保肝，建鯉，腸絨毛，切片，細(xì)胞漿密度
　　Effect of HWBG on Length of Intestinal Villus and Liver cell in Cyprinus Carpiovar Jian
　　ABSTRACT: 50 carps (Cyprinus Carpiovar Jian) with almost the same size and weight ( about 15 grams) were selected and then divided into 5 groups (G1,G2,G3,G4 and G5) randomly,4 levels of adding rate of “HWBG” were used for tested groups ( 0.1%,0.2%,0.4% and 0.8%) , while G1 was used as a control. Two repetitions per group and 10 carps per repetition were performed. After 3 wks of feeding trial, intestinal tract and liver of each carp were taken out for histotomy and the lengths of intestinal vollus were measured. The results showed that the intestinal villi of all tested groups with the different adding rates of “HWBG” were all higher than that of the control(P<0.01), the density of liver cytoplasm of all tested groups with the different adding rates of “HWBG” were all bigger than that of the control. As a conclusion, the optimal adding level was found at 0.4%.
　　Key words：HWBG, Cyprinus Carpiovar Jian, intestinal villus, slice，cytoplasm density
　　*基金項(xiàng)目：福建省科技廳重點(diǎn)項(xiàng)目(項(xiàng)目編號(hào)2009S0082)
　　“和胃保肝”是一種新型的復(fù)方中草藥顆粒飼料添加劑，在畜牧、水產(chǎn)業(yè)中廣泛應(yīng)用，在改善動(dòng)物胃腸道結(jié)構(gòu)，提高肝臟解毒功能，促進(jìn)動(dòng)物生長等方面有明顯效果，屬于一種新型綠色飼料添加劑。這種新型的復(fù)方中草藥顆粒(陳皮、神曲、黃芪、當(dāng)歸、特效中草藥、糖蜜等)是在中獸醫(yī)經(jīng)典方劑的基礎(chǔ)上，不同的中草藥均采取最佳的加工工藝，然后采用糖蜜噴霧造粒制成的適口性好的中草藥飼料添加劑。配方中的糖蜜既發(fā)揮了載體作用，又發(fā)揮了粘結(jié)劑的作用，而且更重要的是糖蜜不僅極大地改善了產(chǎn)品的適口性，同時(shí)還可以活化動(dòng)物腸道有益微生物菌群，改善胃腸道環(huán)境，提高采食量，促進(jìn)動(dòng)物快速生長，減少疾病的發(fā)生。中草藥屬天然產(chǎn)品，具有多種營養(yǎng)成分和生物活性物質(zhì)[1]，兼有藥物和營養(yǎng)的雙重作用;成分復(fù)雜，活性成分多樣，很多中草藥特別是復(fù)方中藥往往同時(shí)具有抗菌、抗病毒和提高非特異性免疫力等多方面的效果;作用機(jī)理獨(dú)特，毒副作用小或無，不會(huì)產(chǎn)生抗藥性[2]，適合長期使用，可以有效克服抗生素等藥物存在的耐藥性、藥物殘留和污染環(huán)境等缺陷，符合水產(chǎn)動(dòng)物無公害養(yǎng)殖的要求。中草藥飼料添加劑近年來中草藥飼料添加劑在水產(chǎn)上的應(yīng)用雖然取得了一定的成果，也有越來越多的中藥添加劑應(yīng)用于水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中，特別是中藥復(fù)方制劑。中草藥制劑在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用不僅在我國日益廣泛，在世界許多其他國家也已成為研究的熱點(diǎn)，愈來愈受到水產(chǎn)科技工作者的青睞。
　　本試驗(yàn)以建鯉為研究對(duì)象，在建鯉基礎(chǔ)料中分別添加不同劑量的“和胃保肝”為試驗(yàn)組，以不添加“和胃保肝”的為對(duì)照組，飼喂一段時(shí)間后，解剖取材、石蠟切片、染色，觀察建鯉腸道腸絨毛高度的變化，探討“和胃保肝”對(duì)建鯉腸絨毛高度和肝細(xì)胞胞漿密度的影響。
　　本試驗(yàn)是驗(yàn)證“和胃保肝”在是否可以通過調(diào)理建鯉的胃腸道和肝臟的功能來促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，選取建鯉腸絨毛高度和肝細(xì)胞胞漿密度為指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)，系為今后對(duì)“和胃保肝”在水產(chǎn)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中的應(yīng)用提供理論依據(jù)，并進(jìn)一步推廣“和胃保肝”在水產(chǎn)業(yè)中的應(yīng)用提供參考，以服務(wù)于現(xiàn)代漁業(yè)的生產(chǎn)與發(fā)展。
　　1 材料與方法
　　1.1 試驗(yàn)材料
　　建鯉(福州閩侯淡水良種繁殖廠)
　　和胃保肝(福建省動(dòng)物藥物工程實(shí)驗(yàn)室)
　　1.2 試驗(yàn)動(dòng)物分組
　　試驗(yàn)前建鯉先用基礎(chǔ)料集中馴養(yǎng)2周再分組，挑選個(gè)體大小及體重相近(規(guī)格：15g左右)的建鯉隨機(jī)分為5組，即基礎(chǔ)料組、0.1%和胃保肝組、0.2%和胃保肝組、0.4%和胃保肝組和0.8%和胃保肝組，每組2個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10只建鯉。分別飼養(yǎng)在消毒過的150 L水族箱里。飼喂時(shí)間：3周。
　　1.3 飼養(yǎng)管理
　　各組水質(zhì)均為脫氯自來水，晝夜24h用增氧機(jī)充氣。采用飽食的方式，每天8：00和16：00分別飼喂和換水1次，每次換水量約為50%，每天的飼料投喂量為建鯉總體重的2%-4%，3d調(diào)整1次投喂量。試驗(yàn)期間水溫保持在27-29℃。
　　1.4 腸道切片制作
　　在建鯉飼喂3周后，解剖取腸道、肝臟，經(jīng)固定、脫水、透明、包埋、切片、脫臘、HE染色、封片制成建鯉腸道組織切片。在光學(xué)顯微鏡下用測(cè)微尺測(cè)定腸絨毛高度，記錄數(shù)據(jù)。
　　1.5 數(shù)據(jù)處理
　　所測(cè)得的腸絨毛高度數(shù)值采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析，LSD多重比較。
　　2 結(jié)果與分析
　　各組建鯉的腸絨毛高度見如表1、圖1-5。
　　表1 “和胃保肝”對(duì)建鯉腸絨毛高度的影響
　　Talel 1. Effect of HWBG on length of intestinal villus
　　in Cyprinus carpiovar Jian

組別	腸絨毛高度（um）
對(duì)照組	329.02±25.8520aA
0.1%和胃保肝組	479.76±43.8589bB
0.2%和胃保肝組	466.19±61.6505bB
0.4%和胃保肝組	565.26±84.1824cD
0.8%和胃保肝組	501.49±63.0133bB

　　注：相同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，不同大寫字母表示差異極顯著(P<0.01)，相同字母表示差異不顯著(P>0.05)。
　　
　　圖1. 對(duì)照組腸絨毛切片
　　Fig1. Iintestinal villus’s slice of control group
　　
　　圖2. 0.1%和胃保肝組腸絨毛切片
　　Fig2. Iintestinal villus’s slice of adding 0.1% HWBG
　　
　　圖3. 0.2%和胃保肝組腸絨毛切片
　　Fig3. Iintestinal villus’s slice of adding 0.2% HWBG
　　
　　圖4. 0.4%和胃保肝組腸絨毛切片
　　Fig4. Iintestinal villus’s slice of adding 0.4% HWBG
　　
　　圖5. 0.8%和胃保肝組腸絨毛切片
　　Fig5. Iintestinal villus’s slice of adding 0.8% HWBG
　　各“和胃保肝”試驗(yàn)組與對(duì)照組間腸絨毛高度差異都極顯著(P<0.01)，不同比例添加量的“和胃保肝”試驗(yàn)組的腸絨毛高度很明顯地高于對(duì)照組，說明0.1%、0.2%、0.4%、0.8%添加量的“和胃保肝”都有助于提高建鯉的腸絨毛高度。其中，以在建鯉中添加0.4%的“和胃保肝”的腸絨毛高度比對(duì)照組的大236.24um，效果最好;其次是0.8%的“和胃保肝組”的腸絨毛高度比對(duì)照組的大172.47um;0.1%的“和胃保肝”組的腸絨毛高度比對(duì)照組的大150.74um;0.2%的“和胃保肝”組的腸絨毛高度比對(duì)照組的大137.17um。
　　肝臟切片中可以得出(見圖6-7)，不同比例添加量的“和胃保肝”試驗(yàn)組能使肝臟的胞漿更緊密，增大肝臟胞漿的密度，胞漿內(nèi)都是正常的肝細(xì)胞，沒有使肝細(xì)胞發(fā)生病變，這將在一定程度上增強(qiáng)肝臟的解毒功能，更有利于營養(yǎng)物質(zhì)的代謝，更能促進(jìn)機(jī)體正常生長。而添加0.4%“和胃保肝”的肝臟中胞漿密度最大，明顯比對(duì)照組的肝臟胞漿排的緊密，胞漿密度大，這將更有利于肝臟發(fā)揮正常的生理功能，更有利于建鯉的健康生長。
　　
　　圖6. 對(duì)照組和胃保肝組肝臟切片
　　Fig6. Liver’s slice of control group
　　
　　圖7. 0.4%和胃保肝組肝臟切片
　　Fig7. Liver’s slice of adding 0.4% HWBG
　　3 討論
　　近年來，關(guān)于中草藥在水產(chǎn)行業(yè)中的應(yīng)用報(bào)道越來越多，中草藥在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的主要作用機(jī)理表現(xiàn)在以下幾個(gè)方面：中草藥含有多種生物活性物質(zhì)和天然營養(yǎng)物質(zhì)，能促進(jìn)動(dòng)物的機(jī)體代謝和蛋白質(zhì)以及酶的合成，進(jìn)而促進(jìn)動(dòng)物的生長，提高營養(yǎng)物質(zhì)利用率[3,4];部分中草藥中含有能有效提高水產(chǎn)動(dòng)物攝食率的成分和特殊氣味，改善飼料口味，提高適口性，具有誘食作用，提高采食量;中草藥中含有的活性成分能調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞，提高魚體的非特異性免疫機(jī)能[5]，增強(qiáng)機(jī)體抵抗病原菌的能力，降低死亡率;一些中草藥能改善魚體的肌肉風(fēng)味和品質(zhì)，更適合消費(fèi)需求[6]。齊遵利等[7]研究表明，復(fù)合中草藥能促進(jìn)草魚的生長、降低餌料系數(shù)、提高魚體免疫能力、降低死亡率。王永玲[8]報(bào)道飼料中添加1%的大蒜能提高鯽魚增重率7.99%，同時(shí)可降低飼料系數(shù)10.37%。
　　小腸和肝臟都是動(dòng)物體內(nèi)重要的器官。肝臟在維持動(dòng)物體新陳代謝中有重大作用，調(diào)節(jié)營養(yǎng)物質(zhì)的代謝和發(fā)揮解毒作用等。腸道是機(jī)體消化、吸收營養(yǎng)物質(zhì)的重要器官，腸絨毛(intestinal villus)是由腸上皮和固有層共同向腸腔突出形成的細(xì)小突起，長約0.35-1mm，可使腸腔表面積擴(kuò)大約10倍，絨毛多呈柱狀、葉狀或指狀等[9]，是小腸的重要組成部分，在吸收營養(yǎng)物質(zhì)上起關(guān)鍵作用，其強(qiáng)有力地有規(guī)則地?cái)[動(dòng)有助于阻止有害菌的定植[10]，同時(shí)絨毛形態(tài)的變化也直接影響絨毛的表面積，進(jìn)而影響腸道對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的吸收能力[11]。腸絨毛長度增長后會(huì)使腸絨毛表面積增加，增大與營養(yǎng)物質(zhì)的接觸面積，從而增強(qiáng)小腸對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的吸收能力，所以腸絨毛的長度與形態(tài)直接關(guān)系著機(jī)體的生長發(fā)育。
　　“和胃保肝”在水產(chǎn)生產(chǎn)中能促進(jìn)水產(chǎn)動(dòng)物生長，本試驗(yàn)的結(jié)果表明“和胃保肝”能提高建鯉飼養(yǎng)3周的腸道腸絨毛高度，這可能是由于“和胃保肝”屬復(fù)方中藥制劑，不同添加比例的“和胃保肝”可以調(diào)理建鯉的胃腸道和肝臟功能，促進(jìn)建鯉的健康生長。
　　本試驗(yàn)中不同添加比例的“和胃保肝”試驗(yàn)組中肝臟胞漿的密度比對(duì)照組均有提高，0.4%“和胃保肝”的胞漿密度比對(duì)照組的明顯增大，這將更有利于肝臟發(fā)揮正常的生理機(jī)能，更能促進(jìn)建鯉的新陳代謝的進(jìn)行。
　　目前水產(chǎn)行業(yè)中的水產(chǎn)動(dòng)物生長加速劑有很多種[12]，有些中草藥能提高建鯉的免疫能力，簡紀(jì)常[13]用添加中草藥(黃芪為主藥，當(dāng)歸為輔藥)的配合飼料投喂建鯉，按質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1.0%的量加入到飼料中，既能明顯提高建鯉的吞噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的數(shù)量，又能提高其溶菌酶的活力，從而明顯提高建鯉的非特異性免疫能力。“和胃保肝”是否能提高建鯉的非特異性免疫還有待進(jìn)一步研究。
　　4 小結(jié)
　　本試驗(yàn)驗(yàn)證了“和胃保肝”能提高建鯉飼養(yǎng)3周的腸道腸絨毛高度，各個(gè)添加量的“和胃保肝”都能極顯著地提高建鯉的腸絨毛高度(P<0.01)和肝臟胞漿的密度，其中以0.4%的添加量效果最好，可以作為一種水產(chǎn)動(dòng)物生長加速劑。
　　參考文獻(xiàn)
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