維生素C對蛋雞新城疫免疫性能的影響

apple12151007

[p=30, 2, center]　[b][size=2]　維生素C對蛋雞新城疫免疫性能的影響[/size][/b][/p][p=30, 2, center][b]　　孟翠紅 1 樊麗軍2[/b][/p]
　　摘要：本實驗將60只體重相近的49日齡海蘭賀蛋雞隨機分為A、B、C、D、E組，每組4個重復，每個重復3只。 B、C、D、E四組頸部皮下注射Ι系新城疫疫苗進行免疫，分別在B、C、D、E日糧中填加0㎎/㎏、200㎎/㎏、400㎎/㎏、800㎎/㎏的維生素C，分四周測血清中的HI效價及脾臟、胸腺、法氏囊等臟器指數。結果表明：添加維生素C可提高HI效價，對新城疫疫苗免疫效果有促進作用，其中400/㎏的維生素C效果較好;C、D、E組的脾臟、胸腺、法氏囊等臟器指數均高于B組，說明添加維生素C能促進脾臟、胸腺、法氏囊等免疫器官生長發育，進而影響細胞免疫和體液免疫性能。
　　關鍵詞：維生素C;新誠疫;蛋雞
　　Effect of Dietary Vitamin C Levels on the Immunity Performance
　　of Newcastle Disease in Egg Chicks
　　A tltal of 60 forty-nine-day-old hailanhe male egg clicks were randomly allocated to five treatments with 12 broilers for each treatment,every treatment had replicates(3 chicks per cage).The A treatment was a blank comparetion,the B、C、D、E treatment were injected with Newcastle Disease’s bacterin in the under of the cervix.The basic diet with vitaminC levels of 200,400,800㎎/㎏ were fed to the C、D、E treatment,measured the serum HI and the spleen ,thymus, brusal’s organs indexs once a week.The result showed that when the experimental diets were fed,the ND bacterin’s immunity effect was improved,and the treatment of being fed with 400㎎/㎏ vitaminC was better than another two.The organs indexs of spleen,thymus,brusal，of the C、D、E treatment were higher than the B treatment,showed than increasing the vitaminC can lead the develop growth of the spleem,thymus, brusal，furthermore effected the cell immunity and body fluid function
　　Key word:VitaminC; Newcastle Disease;hens
　　維生素C是己糖的衍生物，具有酸性，因此也稱L-抗壞血酸，家禽需要維生素C,雞利用維生素C合成類固醇激素和氨基酸，進行礦物質代謝，維持免疫功能。飼料中含有一定量的維生素C，雞的肝和腎也能合成維生素C，因此是否需要給雞的飼料或飲水中添加維生素C，多少年來一直是一個有爭議的問題，而且試驗結果往往是相互矛盾的，目前尚未將維生素C列入雞的飼養標準和雞的必要維生素[1]。雞自身雖然能合成維生素C，但在某些生長、生產階段和高產品種條件下不能滿足其生長和生產的需要，在雞日糧中添加一定量的維生素C是有必要的。維生素C作為一種抗氧化劑，第一，自由基常常攻擊生物膜的多鏈不飽和酸，引發一系列自由基連鎖反應，使生物膜的結構和功能發生改變，但正常機體內的抗氧化防御系統在不同環節上阻斷自由基反應。維生素c和自由基發生反應，減少自由基濃度從而避免細胞膜的破壞，維生素c保護免疫系統淋巴細胞，使得免疫細胞及時產生免疫反應，避免反應推遲，減少雞的急性死亡[2]:第二，維生素C可限制機體在熱應激時腎上腺類固醇的過量分泌，抑制環腺甘酸含量的增加，保護免疫功能，降低不良免疫反應，一種解釋：熱應激改變了內分泌機能的正常狀態，使甲狀腺功能異常，促甲狀腺素分泌量改變，血漿中促腎上腺皮質激素顯著增加，另有一種解釋：熱應激使甲狀腺素利用受阻，使機體對甲狀腺素的產生造成反饋抑制作用所致[3]。第三，維生素c 參與皮質激素-類固醇激素的合成，類固醇激素的功能是體內能量以維持生命功能，最主要的是維持體溫[4]。維生素c是血液中最有用的抗氧化劑，是細胞外液抗氧化系統的第一道防線，對血漿中正在進行的脂質過氧化作用有阻斷作用。維生素c作為自由基清除劑可以很快的與超氧陰離子自由基和過氧化氫反應，更快的與羥氧化基反應形成抗壞血酸自由基，他可以清除單線態氧，從而保護集體免受內源性氧自由基的損害[5]。
　　雞新城疫(Newcastle Disease)是危害養雞業的主要雞病之一。新城疫(ND)，又稱亞洲雞瘟，偽雞瘟等，是一種急性、高度接觸性傳染病。典型新城疫特征為發病急，呼吸困難，頭冠紫黑，下痢，泄殖腔出血、壞死，腺胃乳頭、腺胃和肌胃交界處以及十二指腸出血，慢性病例常有呼吸道癥狀或神經癥狀。 國際獸疫局( OIE) 將其列為 A 類疫病, 我國其列為一類動物疫病。它在世界范圍內出現了幾次大流行, 造成了嚴重的經濟損失。雖然雞新城疫病毒僅有一個血清型, 但不同毒株生物學特性和毒力相差很大。世界各國對ND 的研究已有 60 多年的歷史, 廣泛使用各種疫苗進行免疫也有 30 多年的歷史。我國1935年發現雞新城疫, 現在全國范圍內普遍存在, 并且是我國養雞業危害最大、經濟損失最重的禽病之一。雖然已投入了大量的人力、物力來研究雞新城疫各方面的問題, 并采取了普遍預防接種和其他綜合性防制措施, 取得了明顯的經濟效益, 已大大減少該病所造成損失, 但是雞新城疫仍然是我國家禽的頭號疫病( 在我們西部邊疆民族地區更是如此)[7] 。
　　本試驗一是為了驗證維生素C是否能增強雞新城疫免疫性能，探求添加多少維生素C，免疫效果較好。二是通過增加不同量的維生素C情況下測定新城疫抗體效價以及脾臟、胸腺、法氏囊等臟器指數的變化，進一步探討維生素C對雞免疫器官及對免疫應答的影響。本次實驗主要目的在于研究 vc對蛋雞新城疫抗體效價的影響，以便vc在蛋雞飼養中的應用提供依據。
　　1材料與方法
　　1.1材料
　　1.1.1試驗動物及飼料：
　　60只49日齡海蘭賀蛋雞，購于太古縣某雞場,飼料由正大提供
　　1.1.2試驗疫苗：
　　雞新城疫Ι系苗，雞新城疫Ⅳ系疫苗，由黑龍江省生物制品廠生產
　　1.1.3試驗儀器：
　　50ul定量移液器，移液槍，離心機，高壓鍋，一次性注射器(2.5ml)，PC管，96孔型微量反應板，電子天平
　　1.1.4試驗所需藥品：
　　3.5%檸檬酸鈉溶液，0.9%NaCl氯化鈉溶液，粉劑維生素C(華北制藥)
　　1.2試驗設計：
　　從49日齡海蘭賀蛋雞中挑選出重量接近的60只試驗雞，隨機分成五組，每組4個重復，每個重復3只雞。試驗從56日齡開始至84日齡結束。五組分為A、B、C、D、E組，A組為對照組，B組為模型組， B組為注射疫苗+0㎎/㎏維生素C，C組為注射疫苗+200㎎/㎏維生素C，D組為注射疫苗+400㎎/㎏維生素C，E組為注射疫苗+800㎎/㎏維生素C。
　　1.3試驗內容與方法：
　　1.3.1內容：
　　從49日齡喂基礎日糧，與56日齡對B、C、D、E組頸部皮下注射新誠疫疫苗Ι系苗1ml，同時分別在其各組基礎日梁中添加0㎎/㎏、200㎎/㎏、400㎎/㎏、800㎎/㎏的維生素C，自由飲水，每天喂3次。在注射后第7天(即63日齡)，第14天(即70日齡)，第21天(即77日齡)，第28天(即84日齡)分別從A、B、C、D、E各組中隨機抽取三只先稱其重量，后心臟采血2ml，將注射器傾斜靜置析出血清，分離血清裝入PC管置-20℃冰箱冷凍備用。按常規方法致死，分離并測定脾臟、胸腺、法氏囊的重量，計算臟器指數(免疫器官指數=免疫器官濕重(㎎)/體重(㎏))[5]
　　1.3.2各種成分制備
　　1.3.2.1 四個血凝單位病毒抗原的制備：
　　可用新城疫Ⅳ系苗作抗原，測定其HA效價，據此配成四個血凝單位病毒抗原，然
　　裝小瓶備用
　　1.3.2.2 1%紅細胞懸液制備：
　　先用滅菌注射器吸取3.8%檸檬酸鈉溶液(其量為所需血液量的1/5)，取一只健康雞，心臟采血到需要血量，置滅菌離心管內，加滅菌生理鹽水為抗凝血的2倍，以2000r/min離心10min，棄上清夜，把著附于紅細胞間和上清夜間的白細胞去掉，再加生理鹽水懸浮血球，同上法離心沉淀，如此將紅細胞洗滌3-5次，最后根據所需用量，用滅菌生理鹽水配成1%懸液。
　　1.3.2.3 稀釋液制備：
　　用固體NaCl和雙蒸水配成0. 9%的生理鹽水，高壓滅菌后備用
　　1.3.2.4 抗凝劑：
　　用固體檸檬酸鈉和雙蒸水配成3.8%的檸檬酸鈉100ml，高壓滅菌后備用
　　1.3.3 雞新城疫病毒的HA試驗(β-微量法)[6]，如表1
　　1.3.3.1　用50 uL 定量移液器在1～ 12 孔內各加稀釋液50ul。
　　1.3.3.2　用50 ul 定量移液器取病毒液50ul放入第1 孔內, 混勻, 而后從第1 孔內用50 uL 定量移液器取50ul放入第2 孔內, 混勻后取50ul放入第3 孔內, 如此類推直至第11 孔。第11 孔混勻后棄去50ul。第12 孔為對照孔, 不加病毒液。則病毒稀釋倍數依次為1∶2～ 1∶2 048。
　　1.3.3.3　用50uL 定量移液器取1% 雞紅細胞懸液, 每孔各加50ul。
　　1.3.3.4　把反應板放在振蕩器上振蕩混勻約3～ 5m in, 再置18～ 22℃室溫環境中, 60 min 后觀察結果; 或置于37℃恒溫箱內, 30 m in 后觀察結果。
　　1.3.3.5結果觀察：
　　將微量反應板傾斜成30°-45°, 沉于管底的紅細胞沿著傾斜面向下呈線狀流動者為沉淀, 表明紅細胞未被或不完全被病毒凝集; 如果孔底的紅細胞鋪平孔底, 凝成均勻薄層, 傾斜后紅細胞不流動,說明紅細胞被病毒所凝集。
　　表1 血細胞凝集(HA)試驗
　　孔號 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
　　病毒 1:2 1:4 1:8 1:16 1:32 1:64 1:128 1:256 1:512 1:1024 1:2084 血細胞
　　稀釋度 對照
　　生理鹽 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50
　　(ul)
　　病毒 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 棄去50
　　1%雞 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50
　　細胞(ul)
　　37℃ 15—30min
　　判定結果 # # # # # # # +++ ++ + ---- ----
　　注：#表示完全凝集，+表示不完全凝集，--表示不凝集
　　1.3.4 雞新城疫病毒的HI試驗(β-微量法)[6]，如表2
　　新城疫病毒凝集紅細胞的作用能被特異性抗體所抑制, 因此可用HI 試驗測定雞血清中的HI 抗體效價。
　　1.3.4.1　用50 uL 定量移液器每孔各加50ul稀釋液, 從第1 孔至第10 孔, 第11 孔為4單位病毒液50ul, 第12 孔為血清50ul作為對照。
　　1.3.4.2　用50 uL 定量移液器取血清50ul, 放入第1 孔, 混勻后移50ul至第2 孔, 第2 孔混勻后移50ul至第3 孔。如此連續稀釋至第10 孔, 從第10 孔取50ul棄去。
　　1.3.4.3　用50 uL 定量移液器取四單位病毒液, 1～ 11 孔每孔各加50ul，第12孔加50ul血清,輕輕振蕩，混勻置37℃溫箱作用15-30min
　　1.3.4.4　用50 uL 定量移液器1% 雞紅細胞懸液, 每孔各加1 滴。
　　1.3.4.5　把微量反應板放在振蕩器上振蕩3～ 5 m in后, 置于37～ 38℃恒溫箱內, 30m in 后觀察結果。
　　1.3.4.6 結果：
　　將微量反應板傾斜成30°-45°, 沉于管底的紅細胞沿著傾斜面向下呈線狀流動者為沉淀, 表明紅細胞未被或不完全被病毒凝集; 如果孔底的紅細胞鋪平孔底, 凝成均勻薄層, 傾斜后紅細胞不流動,
　　表2 血細胞抑制凝集(HI)試驗 單位:n㏒2
　　孔號 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
　　病毒 1:2 1:4 1:8 1:16 1:32 1:64 1:128 1:256 1:512 1:1024 病毒 血細胞
　　稀釋度 對照 對照
　　生理鹽 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50
　　(ul)
　　新城疫 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 棄去50 50
　　抗體(ul)
　　4單位 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50
　　病毒(ul)
　　37℃ 15—30min
　　1%雞紅 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50
　　細胞(ul)
　　注：#表示完全凝集，+表示不完全凝集，--表示不凝集
　　2 結果：
　　2.1 維生素C對蛋雞HI的影響，見表3，圖1
　　表3 添加不同量維生素C對血清中抗體HI效價的影響 單位:n㏒2[table=98%]
[tr][td=1,1,4%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt] [/size][/font][/p][/td][td=1,1,20%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]組別[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]第7天[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]第14天[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]第21天[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]第28天[/size][/font][/p][/td][/tr]
[tr][td=1,1,4%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]A[/size][/font][/p][/td][td=1,1,20%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]對照組[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]4.0[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.0a[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]4.4[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.3a[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]4.4[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.2a[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]4.6[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.1a[/size][/font][/p][/td][/tr]
[tr][td=1,1,4%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]B[/size][/font][/p][/td][td=1,1,20%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]疫苗+Vc0[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]6.0[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.4b[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]6.3[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.2bA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]6.6[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.1bA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]7.7[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.3bA[/size][/font][/p][/td][/tr]
[tr][td=1,1,4%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]C[/size][/font][/p][/td][td=1,1,20%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]疫苗+Vc200[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]7.6[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.2c[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]7.6[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.4cA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]7.8[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.5cA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]8.1[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.2bA[/size][/font][/p][/td][/tr]
[tr][td=1,1,4%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]D[/size][/font][/p][/td][td=1,1,20%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]疫苗+Vc400[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]7.6[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.3c[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]8.7[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.2B[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]8.8[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.3B[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]8.9[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.1B[/size][/font][/p][/td][/tr]
[tr][td=1,1,4%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]E[/size][/font][/p][/td][td=1,1,20%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]疫苗+Vc800[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]7.8[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.2c[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]7.5[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.1cA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]7.8[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.1cA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]8.1[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.3bA[/size][/font][/p][/td][/tr]
[/table]
　　注：表中數據肩注大寫字母不同表示差異極顯著(P<0.01)，小寫字母不同表示差異顯著(P<0.05),大小寫字母相同或不標字母差異不顯著(P<0.05).
　　圖1 不同量Vc對HI的影響
　　蛋雞接種雞新城疫疫苗后，HI逐漸升高。第3，4周達到高峰。從表中得出，B組與A組比四周內都差異顯著(P<0.05);第7天，C、D、E組與B組比差異顯著(P<0.05);第14、21中，C、E與B比差異顯著(P<0.05)、D與B比差異極顯著(P<0.01);28天，C、E與B差異不顯著(P>0.05)， D組與B組比差異極顯著(P<0.01)。
　　2.2 維生素C對蛋雞脾臟指數的影響，見表4
　　表4 添加不同量維生素C對脾臟指數的影響 單位：mg/㎏[table=98%]
[tr][td=1,1,11%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt] [/size][/font][/p][/td][td=1,1,14%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]組別[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]第7天[/size][/font][/p][/td][td=1,1,20%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]第14天[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]第21天[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]第28天[/size][/font][/p][/td][/tr]
[tr][td=1,1,11%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]A[/size][/font][/p][/td][td=1,1,14%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]對照組[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]1.96[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.12a[/size][/font][/p][/td][td=1,1,20%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]2.153[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.25a[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]2.318[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.36a[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]2.795[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.45a[/size][/font][/p][/td][/tr]
[tr][td=1,1,11%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]B[/size][/font][/p][/td][td=1,1,14%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]疫苗+Vc0[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]2.108[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.54bA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,20%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]2.234[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.24bA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]2.464[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.78bA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]2.909[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.25bA[/size][/font][/p][/td][/tr]
[tr][td=1,1,11%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]C[/size][/font][/p][/td][td=1,1,14%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]疫苗+Vc200[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]2.44[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.36cA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,20%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]2.418[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.05cA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]2.717[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.29cA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]3.108[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.69bA[/size][/font][/p][/td][/tr]
[tr][td=1,1,11%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]D[/size][/font][/p][/td][td=1,1,14%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]疫苗+Vc400[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]2.679[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.43cB[/size][/font][/p][/td][td=1,1,20%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]2.943[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.23B[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]3.256[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.25B[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]3.665[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.52B[/size][/font][/p][/td][/tr]
[tr][td=1,1,11%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]E[/size][/font][/p][/td][td=1,1,14%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]疫苗+Vc800[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]2.470[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.65cA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,20%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]2.504[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.12cA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]2.844[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.31cdA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]3.103[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.58bA[/size][/font][/p][/td][/tr]
[/table]
　　注：表中數據肩注大寫字母不同表示差異極顯著(P<0.01)，小寫字母不同表示差異顯著(P<0.05),大
　　寫字母相同或不標字母差異不顯著(P<0.05).
　　圖1 不同量Vc對脾臟指數的影響
　　隨著雞的成長，體重增加，脾臟逐漸增大，脾臟指數逐漸增加。B組與A組比四周內都差異顯著(P<0.05);第7，14，21天，C、E組與B組比差異顯著(P<0.05)，D與B比差異極顯著(P<0.01);28天，C、E與B差異不顯著(P>0.05)， D組與B組比差異極顯著(P<0.01)。
　　2.3 維生素C對蛋雞胸腺指數的影響，見表5
　　表5 添加不同量維生素C對胸腺指數的影響 單位：mg/㎏[table=98%]
[tr][td=1,1,10%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt] [/size][/font][/p][/td][td=1,1,16%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]組別[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]第7天[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]第14天[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]第21天[/size][/font][/p][/td][td=1,1,19%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]第28天[/size][/font][/p][/td][/tr]
[tr][td=1,1,10%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]A[/size][/font][/p][/td][td=1,1,16%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]對照組[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]5.174[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.13a[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]5.234[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.65a[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]2.845[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.21a[/size][/font][/p][/td][td=1,1,19%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]1.997[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.49a[/size][/font][/p][/td][/tr]
[tr][td=1,1,10%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]B[/size][/font][/p][/td][td=1,1,16%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]疫苗+Vc0[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]5.385[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.38bA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]5.451[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.33bA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]3.074[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.58bA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,19%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]2.303[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.12b[/size][/font][/p][/td][/tr]
[tr][td=1,1,10%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]C[/size][/font][/p][/td][td=1,1,16%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]疫苗+Vc200[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]5.774[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.21cB[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]5.862[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.24cA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]3.417[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.46cA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,19%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]2.661[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.32c[/size][/font][/p][/td][/tr]
[tr][td=1,1,10%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]D[/size][/font][/p][/td][td=1,1,16%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]疫苗+Vc400[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]6.103[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.13cB[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]6.282[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.09B[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]3.859[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.41B[/size][/font][/p][/td][td=1,1,19%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]2.748[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.21c[/size][/font][/p][/td][/tr]
[tr][td=1,1,10%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]E[/size][/font][/p][/td][td=1,1,16%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]疫苗+Vc800[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]6.165[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.45cB[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]5.674[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.21cA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]3.495[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.31cA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,19%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]2.541[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.26c[/size][/font][/p][/td][/tr]
[/table]
　　注：表中數據肩注大寫字母不同表示差異極顯著(P<0.01)，小寫字母不同表示差異顯著(P<0.05),大
　　寫字母相同或不標字母差異不顯著(P<0.05).
　　圖2 不同量Vc對胸腺指數的影響
　　隨著雞的成長,體重增加,胸腺先增加后減小，胸腺指數先增加后減小。B組與A組比四周內都差異顯著(P<0.05);第7天，C、D、E組與B組比差異極顯著(P<0.01)，第14、21中，C、E與B比差異顯著(P<0.05)、D與B比差異極顯著(P<0.01);28天，C、D、E與B差異顯著(P<0.05) 。
　　2.4 維生素C對蛋雞法氏囊指數的影響，見表6
　　表6 添加不同量維生素C對法氏囊指數的影響 單位：mg/㎏[table=98%]
[tr][td=1,1,10%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt] [/size][/font][/p][/td][td=1,1,16%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]組別[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]第7天[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]第14天[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]第21天[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]第28天[/size][/font][/p][/td][/tr]
[tr][td=1,1,10%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]A[/size][/font][/p][/td][td=1,1,16%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]對照組[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]4.004[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.35a[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]4.493[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.21a[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]3.044[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.49a[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]2.086[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.56a[/size][/font][/p][/td][/tr]
[tr][td=1,1,10%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]B[/size][/font][/p][/td][td=1,1,16%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]疫苗+Vc0[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]4.247[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.38b[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]4.493[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.22bA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]3.285[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.25bA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]2.217[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.23bA[/size][/font][/p][/td][/tr]
[tr][td=1,1,10%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]C[/size][/font][/p][/td][td=1,1,16%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]疫苗+Vc200[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]4.433[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.32c[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]4.493[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.23cA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]3.678[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.36cA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]2.417[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.38bA[/size][/font][/p][/td][/tr]
[tr][td=1,1,10%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]D[/size][/font][/p][/td][td=1,1,16%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]疫苗+Vc400[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]4.598[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.71c[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]4.493[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.24B[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]4.021[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.47B[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]2.841[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.41B[/size][/font][/p][/td][/tr]
[tr][td=1,1,10%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]E[/size][/font][/p][/td][td=1,1,16%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]疫苗+Vc800[/size][/font][/p][/td][td=1,1,17%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]4.671[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.57c[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]4.493[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.25cA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]3.712[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.25cdA[/size][/font][/p][/td][td=1,1,18%][p=30, 2, center][font=宋體][size=12pt]2.54[/size][/font][font=宋體][size=12pt]±0.42bA[/size][/font][/p][/td][/tr]
[/table]
　　注：表中數據肩注大寫字母不同表示差異極顯著(P<0.01)，小寫字母不同表示差異顯著(P<0.05),大
　　寫字母相同或不標字母差異不顯著(P<0.05).
　　圖3 不同量Vc對法氏囊指數的影響
　　隨著雞的成長,體重增加,法氏囊先增加后減小，法氏囊指數先增加后減小。 B組與A組比差異顯著(P<0.05)。第7天，C、D、E組與B組比異顯著(P<0.05)，第14、21、28天中D、E與B比差異顯著(P<0.05)， D組與B組比差異極顯著(P<0.01); 14、21中，C、E與B比差異顯著(P<0.05)、D與B比差異極顯著(P<0.01);第28天，C、E與B比差異不顯著(P<0.05)、D與B比差異極顯著(P<0.01)
　　3討論
　　3.1 維生素C對雞新城疫HI效價的影響
　　從表3看出，B與A差異顯著，表明接種雞新城疫Ⅰ系苗與不接種疫苗比可提高HI滴度水平，增強機體免疫力。免疫后第7天Vc200mg/kg、Vc400mg/kg，Vc800mg/kg添加組顯著高于模型組Vc0mg/kg(p<0.05)，表明添加添加維生素C可提高HI滴度水平，第14、21天Vc400mg/kg添加組極顯著高于模型組Vc0mg/kg，，表明400mg/kg Vc可延長HI值高峰期，這與盛清凱等所得的實驗結果相一致[8]。
　　3.2 維生素C對免疫器官等臟器指數的影響
　　在生物醫學研究中組織形態學及臟器重量、臟器指數也是衡量動物功能的重要指標，尤其是臟器重量和體積是一個重要的觀察指標。動物主要臟器重量和臟器指數動物慢性實驗指定測驗項目。根據臟器重量、臟器指數可以判定內臟器官病變的性質和程度，所以實驗動物臟器重量、臟器指數是動物實驗中常用的重要基礎數據[9]。
　　通常認為雞的免疫系統分為三個系統，即體液免疫系統、分泌系統及細胞免疫系統。體液和分泌免疫系統又屬于腔上囊(B細胞)依賴系統，而細胞免疫系統為胸腺(T細胞)依賴系統，腔上囊(法式囊)是一個重要的中樞免疫器官，為禽類所特有，他對體液免疫的形成和功能具有特別的重要作用，法氏囊是禽類B淋巴細胞的發源地，在B淋巴細胞成熟過程中起著非常重要的作用。脾臟為外周免疫器官，在體液免疫中發揮重要作用;在捕獲和處理抗原方面具有重要作用。胸腺為中樞免疫器官是T淋巴細胞成熟分化的場所;脾臟、胸腺、法式囊能反映免疫器官發育和免疫細胞功能狀況，間接反映了機體的免疫水平[10]。
　　3.2.1維生素C對脾臟發育的影響：
　　從表4得出，四周B組都顯著高于A組，表明接種雞新城疫系苗可促進脾臟的生長發育。免疫后第7、14、21天，Vc200mg/kg、Vc800mg/kg添加組顯著高于模型組Vc0mg/kg(p<0.05)，免疫后第7、14、21、28天Vc400mg/kg添加組極顯著高于模型組Vc0mg/kg，，表明添加Vc可促進脾臟的生長發育，其中Vc400mg/kg添加組與Vc200mg/kg、Vc800mg/kg添加組比更能促進脾臟的發育，這正與討論3.1得出的結論相吻合。
　　3.2.2維生素C對胸腺發育的影響：
　　從表5得出，四周內B組都顯著高于A組，表明接種雞新城疫系苗可促進脾臟的生長發育。免疫后第7、14、21、28天，Vc200mg/kg、Vc400mg/kg，Vc800mg/kg添加組顯著或極顯著高于模型組Vc0mg/kg(p<0.05)，說明添加Vc可促進胸腺的發育。由于胸腺是機體T淋巴細胞發育地方，本實驗中添加200mg/kg、400mg/kg，800mg/kgVc都能促進胸腺的發育，從而延緩胸腺的萎縮，維持機體特異與非特異免疫功能。
　　3.2.3維生素C對法氏囊發育的影響：
　　從表6得出，四周B組都顯著高于A組，表明接種雞新城疫系苗可促進法氏囊的生長發育。免疫后第7、14、21天，Vc200mg/kg、Vc800mg/kg添加組顯著高于模型Vc0mg/kg(p<0.05)，14、21、28天Vc400mg/kg添加組極顯著高于模型組Vc0mg/kg，表明添加Vc可促進脾臟的生長發育，其中Vc400mg/kg添加組效果較好。由于法氏囊是禽類B淋巴細胞發育成熟的地方，本試驗也證明添加Vc能影響法氏囊的發育，促進B淋巴細胞的生長，從而提高抗體水平。
　　4 結論：
　　本試驗驗證了在飼料中添加Vc可提高機體抗體效價，增強免疫力，其中添加400mg/kg產生的效果較好;同時也會促進脾臟、胸腺、法氏囊等免疫器官的發育，從而通過體液免疫和細胞免疫兩種途徑增強機體抵抗力。
　　近年來，人們發現添加某些成份對機體免疫功能的調節有劑量依賴性，表現為小劑量(或低濃度)促進機體免疫功能，大劑量(高濃度)抑制機體免疫功能[10]。本實驗由于時間和其他方面的因素，更大劑量的維生素C對動物機體免疫是否有抑制作用，還有待進一步研究。
　　參考文獻
　　[1] 楊治因，維生素c在雞營養中的作用[J]，鄭州牧學專報，1996，16(1)：40-41
　　[2] 姚火春，獸醫微生物學實驗指導(第二版)[M]，中國農業出版社，2002.2：105-107
　　[3] 向瑞平，孫衛東，王小龍等，日糧中添加VE和VC對肺動脈高壓綜合征患雞自由基代謝的影響[J]，中國獸醫學報，2005，25(1)：73-76
　　[4] 吳凡，維生素C在飼喂肉雞上的應用，湖南飼料[J]，2005，(3)：33-34
　　[5] 董發明，韋旭斌，中藥蒼芪散提高雞新城疫疫苗免疫功能的研究[J]，中國醫學雜志，1997，(1)：4-5
　　[6] 吳明華，李維召，雞新城疫免疫研究[J]，中國農村科技，2006，(3)：17-18
　　[7] 盛清凱，武英，成建國等，熱應激狀況下維生素C對蛋雞免疫性能的影響[J]，黑龍江畜牧獸醫，2006，(7)：43-44
　　[8] 李吉慶，李文龍，王東平等，不同日齡smad3基因剔除小鼠的臟器重量及臟器指數[J]，動物學研究，2005，26(3)：322-327
　　[9] 李學檢，潘樹德，袁纓等，牛磺酸對雞ND-HI抗體產生影響的研究[J]，動物科學與動物醫學，2002，
　　[10] 徐亞芬，牛加強。藏藥紅景天對藏雞ND-HI抗體水平的影響[J]，畜牧與獸醫，2005，37(5)：45-46
　　作者簡介：孟翠紅，女，運城農業職業技術學院 教師, 在山西農業大學功讀碩士研究生 ， 從事動物營養與飼料科學方面的研究與教學。Email:mengcuihong88@hotmail.com
　　通訊地址：運城農業職業技術學院 運城市紅旗東街46號 郵編：044000
　　樊麗軍：男，2004年畢業于山西農業大學，動物科學專業，現在山西省晉城市沁水縣畜牧局從事本專業工作。

shuwen8131

學習了，多一些真實的實驗報告就好

luohuaping228

資料收藏了，謝謝樓主，以后有這方面的資料也要和大家分享喲