犬人工授精的步驟及常用技術(shù)要訣

baiming3434 · 發(fā)表于 2010-12-19 10:46:53

犬的人工授精是指用人工的方法，將公犬的精液采取出來，通過嚴(yán)格的科學(xué)檢查處理，用鮮精液或冷凍精液，輸入到母犬的生殖器官內(nèi)，使精子與卵子結(jié)合，達(dá)到繁殖優(yōu)良犬的目的。
一、采精
1 ．采精的準(zhǔn)備工作
（ 1 ）場(chǎng)地的準(zhǔn)備為了保證公犬有一個(gè)良好的性欲反射條件，必須選好采精的場(chǎng)地。采精場(chǎng)應(yīng)寬敞、安靜、清潔，并要徹底消毒。
（ 2 ）臺(tái)犬的準(zhǔn)備目前多采用發(fā)情的母犬作為臺(tái)犬。采精前臺(tái)犬的后軀、尾根部、外陰部、肛門部位，都應(yīng)徹底洗滌清潔，再用消毒過的干抹布擦干。
2 ．采精技術(shù)
（ 1 ）手握法當(dāng)公犬爬跨，陰莖勃起時(shí)，采精人員一只手抓住**的球狀部位之后，另一只手拿著容器收集精液。在收集精液時(shí)，要特別注意器具不能觸及**，否則會(huì)造成射精停止。另外，采精手應(yīng)在**的背部必須保持一定的壓力。用這種方法采到精液，可直接給發(fā)情的母犬輸精，不宜保存。
（ 2 ）假陰道采精法首先應(yīng)根據(jù)公犬的陰莖大小制作陰道，其結(jié)構(gòu)主要由外殼、內(nèi)胎、采精杯及附件組成。在應(yīng)用時(shí)先在假陰道內(nèi)胎中裝上熱水，其溫度應(yīng)保持40℃。假陰道內(nèi)表面不必潤(rùn)滑劑，因?yàn)榘l(fā)情母犬陰道略顯干燥。當(dāng)公犬爬跨母犬時(shí)，將陰莖導(dǎo)入假陰道內(nèi)、也可以用手淫的方法，待陰莖勃起時(shí)，推進(jìn)陰道，另一只手持**后的陰莖，助手輕輕地打氣，使假陰道產(chǎn)生一定的壓力，以便刺激公犬繼續(xù)射精。
二、精液品質(zhì)檢查
1 .精液量
藏獒的射精量，因其個(gè)體、年齡、采精方法、采精頻率和營(yíng)養(yǎng)狀況等多種因素影響。射精量太多，可能是由于過多的副性腺泌物或其他異物混入，若過少可能是由于采精方法不當(dāng)或生殖官功能衰退所致。發(fā)現(xiàn)這種情況就應(yīng)該改進(jìn)采精技術(shù)和方法，改進(jìn)公大飼養(yǎng)管理或調(diào)整采精頻率。
2 ．精液的色譯大正常的精液為乳白色或灰白色，精子數(shù)量越多，乳白色越深。若精液呈淡綠色是混有濃液，呈淡紅色是其中混有血液，呈黃色是混有尿液，凡屬上述顏色的異常精液，應(yīng)該丟棄或停止采精。
3 ．精子活率
是指精液中有改線前進(jìn)運(yùn)動(dòng)的精子百分率，是評(píng)定精液品質(zhì)優(yōu)劣的重要指標(biāo)之一，也稱精子活力。檢查方法是在載玻片上放1滴精液，用蓋玻片壓上，制成壓片置于400倍的顯微鏡下觀察。精子活率一般采用10級(jí)評(píng)分，即按精子直線前進(jìn)運(yùn)動(dòng)的百分比評(píng)為10個(gè)等級(jí)： 100 ％前進(jìn)者為 1 . 0 分，90 %前進(jìn)的為0.9分，以下類推。
4 ．精子密度
是指精液的單位容積（1mL）內(nèi)所含精子數(shù)目，是評(píng)定精液品質(zhì)的一項(xiàng)重要指標(biāo)，也稱精子濃度。目前測(cè)定精子密度的方法主要采用估測(cè)法、血細(xì)胞計(jì)算器計(jì)算法。
（ l ）估測(cè)法此法通常與檢查精子活率（不做稀釋）同時(shí)進(jìn)行，在顯微鏡下根據(jù)精子分布稠密程度粗略地分為“密”、“中”、“稀” 3 級(jí)。
①密整個(gè)視野充滿精子，精子之間的空隙小于 l 個(gè)精子，看不見精子的活動(dòng)情況，這種精液每毫升含有精子 10 億以上。
②中精子在視野中比較分散，精子與精子之間的空隙約與精子本身長(zhǎng)度相等，可以分清精子活動(dòng)情況，這種精液每毫升含精子 3~10 億。
③稀在視野中只能見到少數(shù)精子，精子之間的空隙很大，這種精液每毫升含精子在 2 億以下。
（ 2 ）計(jì)算法用血細(xì)胞計(jì)算器，在顯微鏡下計(jì)數(shù)，是比較準(zhǔn)確的方法是先用血細(xì)胞吸管稀釋精液之后將精液稀釋20 倍時(shí)，用血紅細(xì)胞吸管稀釋：把精液稀釋成 200 倍時(shí)，則用血紅細(xì)胞吸管稀釋。稀釋液用 3 ％的氯化鈉溶液，以殺死精子便于計(jì)算，其計(jì)數(shù)方法與血細(xì)胞計(jì)數(shù)相同。
5 ．精子的畸形率
是指形狀不正常的精子。畸形情子種類很多，如頭部巨大、瘦小、細(xì)長(zhǎng)、圓形、輪廓不清、皺縮、缺損、雙頭等，頸部膨大、纖細(xì)、屈折、雙體等，主段彎曲、屈折、回旋、短小、長(zhǎng)大、缺陷、帶原生質(zhì)滴、雙尾等，精液中的畸形精子的比率越高，受孕率就越低。一般認(rèn)為，犬精子畸形率不得超過 20%。
6 ．精子的存活時(shí)間及存活指數(shù)
是指離體精子在一定條件下的壽命，這是判斷精子受精能力的一項(xiàng)指標(biāo)。將精液采出后，應(yīng)立即稀釋1: 2 ~3 倍，將稀釋精液置于一定的溫度（0℃~37℃）下，間隔一定時(shí)間檢查精子活率，直至無活動(dòng)精子為止，所需的總小時(shí)數(shù)為存活時(shí)間；兩相鄰2次檢查的平均活率（即 2 次活率相加÷2 ）與間隔時(shí)間的積相加總和為生存指數(shù)。精子的存活時(shí)間越長(zhǎng)，指數(shù)越大，說明精子活力越強(qiáng)，品質(zhì)也越好，受精率也越高。
7. pH 值的側(cè)定
測(cè)定的方法是用萬能試紙比色或電動(dòng)比色來側(cè)定，犬的精液ph值平均為 6 . 4 （ 6 . 1~7 . 0 ） , pH 值的高低與副性腺分泌物有關(guān)，第一部分精液 pH 值居中、第二部分精液的 pH 值最低；第三部分精液的 pH 值最。pH值偏低的品質(zhì)較好， pH值偏高的精子活力、受精力都顯著降低。
三、精液的稀釋
精液稀釋的目的在于增加精液的容量，擴(kuò)大配種頭數(shù)。稀釋液的成分很多．大致可分為以下 4 類。
1 ．稀釋劑
主要用以擴(kuò)大精液容量，如等滲氯化納溶液、等滲葡萄糖溶液等。
2 ．營(yíng)養(yǎng)劑
主要提供營(yíng)養(yǎng)，以補(bǔ)充精子所消耗的能量，如葡萄糖、果糖、乳糖、蔗糖、鮮奶、奶制品、卵黃等。
3 ．保護(hù)劑
對(duì)精子起保護(hù)作用。其中有緩沖物質(zhì)，如檸檬酸鈉、酒石酸鉀、鈉、磷酸二氫鉀、只羥甲基氨基甲烷、堿性緩沖液等；非電解物質(zhì)，如各種糖類、氨基乙酸等；抗菌物質(zhì)，如青霉素、鏈霉索、卡那霉素、林肯霉素、多黏菌素、氯霉素等；抗凍物質(zhì)，二甲基亞颯等。
4 ．其他添加劑
酶類，如過氧化氫酶β一淀粉酶等；激素類，如縮宮類素，前列腺素 E 型等；維生素類維生素 B1、維生素B2、維生素B12、維生素 C 、維生素 E 等；其他成分，如二氧化碳、乙酸、乙二銨四乙酸、乙烯二醉、亞蹄酸鉀、聚乙烯吡咯烷酮、ATP 、精氨酸、咖啡因、冬眠靈等。
四、常用稀釋液的配制
1．奶粉稀釋液
奶粉 10~12g，放在三角燒杯內(nèi)，然后加人燕餾水100mL , 攪拌均勻后過濾，進(jìn)行蒸煮消毒。
葡萄糖（蔗搪）稀釋液：無水葡萄糧7g，溶解于100mL 蒸餾水中，過濾，煮沸消毒。
2 ．奶粉、卵黃稀釋液
取奶粉 10g先用少量水調(diào)成糊狀，再加蒸餾水至 100mL用紗布過濾，在水浴中加溫至95 ℃，待冷卻后加入卵巢10mL，青霉素 10 萬ug，鏈霉素 10 萬ug。
稀釋倍數(shù)，一般根據(jù)原精液的密度來決定，通常犬精液可稀釋 l~3 倍。
五、精液的保存
精液的保存方法，可分為常溫（15 ℃一25 ℃）．低溫（0 ℃ ~5 ℃）和冷凍？（-79 ℃~-l96％℃）
1．常溫保存法
主要是利用一定范圍的酸性環(huán)境抑制精子的活動(dòng)，以減少其能全的消耗。常溫有利于微生物的繁殖，故需加入一定的抗生素。此外，加入必要的營(yíng)養(yǎng)和保護(hù)物質(zhì)，也會(huì)有良好的作用。用卵黃、拘櫞酸鈉稀釋犬的第二部分精液，保存 4 天，精子仍其有活力。
2 ．低溫保存法
一般用冰箱或冰塊作冷凍源，也可以將貯精瓶浸人井水中。低溫可以抑制精子的活動(dòng)，降低精子的活動(dòng)能量消耗，但是冷的刺激又影響精子的生命。所以在稀釋液中必項(xiàng)加入營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，如卵黃、奶粉等。犬的第二部分精液用等量的卵黃和 2 . 68 ％枸櫞粉酸鈉溶液稀釋，在4 ℃的條件下保存，96小時(shí)后還能有 50 ％的仔活率；用巴氏滅菌的牛奶做等里稀釋，在4 ℃條件下能保存120 小時(shí)，存活率為 50% ，并能使母犬受孕。
3 ．冷凍保存法
利用-196℃的液氮、干冰-79℃或其他制冷設(shè)備作為冷凍源，將精液經(jīng)過特殊處理后，保存在超低溫下，以達(dá)到長(zhǎng)期保存的目的。因分裝形式不同，分為顆粒精液、塑料細(xì)管精液和安瓶冷凍精液。據(jù)報(bào)道，犬的冷凍精液解凍后活力低，受精率很低，有待于進(jìn)一步研究，但取鮮精做人工授精，受精率較高，也是提純復(fù)壯的好辦法和可行技術(shù)。
六、輸精
輸精是指用輸精器把精液愉送到母犬的生殖道內(nèi)，使母犬達(dá)到受精的方法。
1．母犬的準(zhǔn)備
將發(fā)情母犬保定后，尾巴拉向一邊，將陰門及附近用溫肥皂水擦洗干凈，并用消毒液進(jìn)行消毒，而后再用生理鹽水沖洗，之后擦干凈。
2 ．輸精管的準(zhǔn)備
犬的輸精管可用尼龍導(dǎo)管、玻璃細(xì)管等，使用前應(yīng)徹底消和認(rèn)真的檢查，不能出漏洞。
3. 精液的準(zhǔn)備
新采取的精液，經(jīng)稀釋后應(yīng)進(jìn)行品質(zhì)檢查，然后進(jìn)行輸精。保存的精液，需要升溫到35 ℃左右，經(jīng)過鏡檢后合乎標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，方可用來輸精。
4 ．輸精方法
將母犬站立保定，使輸精管沿著背線方向緩慢地旋轉(zhuǎn)插入陰道7~10cm深，于子宮頸口的位置，慢慢注人精液，輸完精后，母犬的后軀抬高片刻，以防止精液流出。