植酸酶檢測(cè)酶活為什么很低，請(qǐng)高手賜教

wy0351

       我按照國標(biāo)做的植酸酶測(cè)定，但是酶活總是很低，5000U的測(cè)出來2000多一點(diǎn)，而且結(jié)果數(shù)據(jù)很不穩(wěn)定，反應(yīng)過程中標(biāo)準(zhǔn)空白和樣品空白的操作是一樣的嗎？都是先加終止液再加底物的嗎？加入底物后的樣品空白是渾濁的，離心后測(cè)出的吸光值是負(fù)數(shù)，請(qǐng)問這個(gè)現(xiàn)象是正常的嗎？拜托高手賜教，感激之至！

lhx

期待檢測(cè)過的回答

馬前卒

植酸酶含量的檢測(cè)平行性不好！反應(yīng)條件很難控制。

saturnbio

沒親手做過，改天問一下檢測(cè)人員。

極限天空

1.樣品先加底物,空白先加終止液.
2.控制好PH值和溫度.時(shí)間.
3.國標(biāo)的檢測(cè)方法不是很好用.
4.有的廠家的植酸酶測(cè)定結(jié)果不大穩(wěn)定.
5.對(duì)檢測(cè)人員的要求比較高,

wy0351

您好，我想請(qǐng)問一下有什么方法測(cè)植酸酶比較好一點(diǎn)呢。我剛接手這個(gè)實(shí)驗(yàn)，以前的人也是按國標(biāo)做的，我做了幾天發(fā)現(xiàn)國標(biāo)里好多說的很含糊，而且有的感覺不是很對(duì)，例如偏釩酸銨溶液配制那就有誤導(dǎo)的感覺，硝酸不能提前加入的，還有，做標(biāo)準(zhǔn)曲線，前面說的按無機(jī)磷的量，而后面給出的公式好像是按濃度來算的。我現(xiàn)在很迷茫，我的樣品空白老是測(cè)出負(fù)值，不知道原因是什么。我的回歸方程系數(shù)也很低

liyunhuddt

你如果用標(biāo)準(zhǔn)空白調(diào)零的話，樣品空白是負(fù)值是正常的，用樣品的OD減去空白算木什么影響。我們做的時(shí)候一般用蒸餾水調(diào)零，這樣比較穩(wěn)定。

fm001982

注意底物，有些植酸鈉配置出來有可能使PH發(fā)生變化，需要調(diào)整。

夜飲_客天下

這個(gè)問題解決沒有？

361759357

也許不一定是檢測(cè)的問題，可能是植酸酶自身存在問題也不一定，本來植酸酶就及其不穩(wěn)定。