氯化膽堿原料的摻假識別（轉）

verdanki_576 · 發表于 2011-4-10 18:26:57

　　膽堿是生物體內不可缺少的基本組分之一，通常被認為是B族維生素類的一種（也稱為維生素B4），它在生物體內具有不可替代的基本功能，主要體現在3個方面：它是細胞膜的組成成分之一；促進脂肪的分解（避免脂肪肝）；傳遞神經信號。當動物體內膽堿不足時，將表現膽堿缺乏癥：家禽表現為生長受阻；肝臟和腎臟出現脂肪浸潤；脛骨短粗，出現滑腱癥；死亡率提高；產蛋率下降；蛋規格縮小。豬表現出生長緩慢；行為紊亂，神經錯亂；營養不良，繁殖力差；脂肪肝等。因此滿足動物體內膽堿需要量，對于維持動物健康成長和正常生產力具有重要意義。雖然天然飼料原料中都存在膽堿，但其數量不足以滿足動物每天的生長需要，必須在飼料中添加。在飼料工業中，膽堿通常以氯化膽堿的形式添加，目前我國氯化膽堿添加劑主要是50％的粉劑，另外還有60％的粉劑和70％的水劑，但最常用的是50％的粉劑。該產品執行GB10818－89，含量測定為高氯酸滴定法，測定原理是先用甲醇將氯化膽堿萃取出來，將溶劑蒸發掉，然后用乙酸汞將氯化膽堿轉化為乙酸鹽和難電離的氯化汞，在乙酸介質中用高氯酸對生成的乙酸鹽進行滴定。對于真正的氯化膽堿，用該法測出的氯化膽堿含量準確、可靠。但最近幾年隨著市場的供大于求，一些不法廠家在壓低價格的同時，在氯化膽堿中摻入其它低成本的物質如氯化物、銨鹽或三甲胺原料等，這種摻假的氯化膽堿用國標方法檢測無法發現問題，若使用于飼料中，會給飼料廠家的飼料質量信譽度帶來極大的負面影響，并使養殖戶蒙受經濟上的損失。因此如何有效識別氯化膽堿的摻假，得出氯化膽堿的真實含量對于飼料廠來說具有重要的現實意義。筆者根據工作實踐，參考有關資料，在這方面積累了一定經驗，進行以下總結。

　　目前國內通常有4種測定50％氯化膽堿粉劑中氯化膽堿含量的方法：（1）非水滴定法；（2）銀量法；（3）定氮法；（4）四苯硼鈉重量法。

　　一、方法介紹

　　1、非水滴定法（GB10818－89）

　　稱取80℃下干燥3h的樣品0.7g（稱準至0.0002 g），置于250 ml三角瓶中，加甲醇40 ml，充分搖動30 min后過濾，再分別用20ml、15ml、15ml甲醇洗滌沉淀3次，將濾液和洗液合并，在水浴上蒸發至干，備用。在上述三角瓶中加入20ml冰乙酸使溶解，再加2ml乙酸酐，10ml乙酸汞試液和兩滴結晶紫指示液，搖勻，用高氯酸標準溶液滴定至溶液呈純藍色。同時做空白試驗。

　　2、銀量法（莫爾法）

　　稱取樣品1.4g（稱準至0.0002g），置于100ml容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，放置20min，過濾，棄去初濾液，準確量取續濾液50ml于250ml三角瓶中，加鉻酸鉀指示液0.5ml，用0.1ml硝酸銀標準溶液滴定至呈紅色即為終點。同時進行空白試驗。

　　3、定氮法

　　(1)稱取樣品3g（稱準至0.0002g），置于250ml干燥的三角瓶內，加水100ml，充分振蕩15min，過濾，吸取濾液10ml，按凱氏定氮法先消化再蒸餾測其總氮量N總。

　　(2)另取濾液10ml于消化管內，加水20ml，加400g/L的NaOH溶液20ml，直接在定氮儀上蒸餾，測定其含氮量N0。

　　(3)再取濾液10ml于消化管內，加400g/L的NaOH溶液5ml，在電爐上蒸餾至無堿性氣體跑出（pH試紙呈中性），按凱氏定氮法先消化再蒸餾測其含氮量N1。

　　4、四苯硼鈉重量法

　　精確稱取樣品1g（稱準至0.0002g），置于100ml容量瓶內，加水80ml充分搖動20min，用水定容，過濾，棄去初濾液，準確量取續濾液10ml于100ml燒杯中，加水20ml，1滴10％AlCl3溶液，20ml 2％四苯硼鈉溶液，振蕩30min，在預先稱好重量的G4砂芯漏斗上過濾，置105℃恒溫干燥箱中烘至恒重。計算：氯化膽堿重量W1=殘渣重（g）×0.3298×100/10。

　　氯化膽堿含量=W1×100/樣品重

　　二、實驗室中如何利用各檢測方法進行摻假識別，得出氯化膽堿的真實含量

　　上述4種檢測方法中前3種都不是針對氯化膽堿的特定結構或特異理化性質而建立的，四苯硼鈉法會受到K＋、NH4＋干擾，對于不同的摻假物，用其中一種方法檢測不一定能夠識別，因此在具體檢測中不同樣品應具體對待。下面就如何利用各檢測方法進行氯化膽堿粉劑原料的摻假識別進行總結。

　　1、高氯酸滴定法雖然不是氯化膽堿的特異性反應，但在用此法檢測時，對于真正的氯化膽堿粉劑原料，溶劑蒸發完后，三角瓶瓶壁附著物呈半透明的結晶物，冰乙酸溶解后溶液澄清，滴定終點明顯。若瓶壁附著物為較厚的一層不透明物，冰乙酸溶解后溶液混濁，且滴定終點不明顯，盡管最終也能變成終點的顏色，但不是在一滴之間突然飛躍，對該樣品的純真性就值得懷疑。

　　2、對于上述方法檢測可疑的樣品，用定氮法進行檢測。根據氯化膽堿的分子式C5H14NClO（其分子量為139.63），理論上50％的粉劑原料含氮量為5％，因此若含氮量N總很低，可以斷定為摻假樣品。正常情況下N0很低，一般不超過0.1％，相當于一般試驗的空白值，N1≈N總。若不是這樣，則為摻假樣品。下面是筆者在日常工作中所遇到的一些樣品定氮法的檢測情況，見下表：

　　定氮法檢測結果

　　樣品編號

　　N總 5.86％ 5.02％ 4.85％

　　N0 5.06％ 0.91％ 0.08％

　　N1 0.78％ 4.10％ 4.80％

　　樣品1中，N0≈N總，說明樣品中幾乎全是三甲胺、銨鹽或其它可與氫氧化鈉反應的含氮物，為假的氯化膽堿。

　　樣品2中，N0較高，說明該樣品中三甲胺殘留較高，為不合格的氯化膽堿。

　　樣品3中，N1≈N總，可以斷定該樣品中沒有摻入銨鹽、三甲胺或其它可以與氫氧化鈉反應的含氮物。對于此樣品，需進一步用重量法測定。我們曾遇到一個樣品，用定氮法、銀量法測定含量均正常，用高氯酸法滴定時滴定終點不太明顯，這3種方法測定結果均在55％左右，但用重量法測定時氯化膽堿含量只有27.1％，為摻假樣品。

　　3、在檢測中我們還發現用重量法、高氯酸法、銀量法檢測合格，用定氮法卻發現為摻假樣品。N0很高，N0≈N總。

　　三、結論

　　目前市場上利用國家標準檢測氯化膽堿含量方法的局限性，摻假現象五花八門。針對不同的摻假情況，用上述其中一種方法不一定都能識別，通常用不同方法逐步排除。因此對于一個氯化膽堿粉劑原料，不能根據國家標準檢測合格就算完事，還需用不同的方法進一步驗證。特別是在一個樣品用高氯酸滴定終點不明顯時，更須認真對待，用其它幾種方法進一步驗證。只有4種方法檢測結果一致，才能下合格的結論，保證檢驗結果的準確性。