活性酵母對斷奶仔豬盲腸微生物區系的影響

邦士富—漁

試驗選取 96頭 21 日齡斷奶的三元(杜×大×長)雜種仔豬，按體重和性別隨機分為4組，每組 3個重復，每個重復8頭仔豬，探討活性酵母對斷奶仔豬微生物區系、胃腸道發育和揮發性鹽基氮的影響。結果表明，單獨添加耐熱性活性酵母(10l0 CFU／kg 飼糧)能顯著(p<0.05)降低腸道內容物大腸埃希氏菌數和調節腸道微生物菌群平衡。耐熱性活性酵母與金霉素組合以及普利菌+金霉素組合也有一定程度調節腸道微生物菌群平衡的能力。添加耐熱性活性酵母與金霉素組合能顯著提高(p<0.05)28 日齡和 56 日齡斷奶仔豬腸絨毛高度。單獨添加耐熱性活性酵母也能提高 28日齡和 56日齡斷奶仔豬腸絨毛高度(p>0.05)。添加普利菌＋金霉素組合對斷奶仔豬腸絨毛高度無顯著影響(p>0.05)，56 日齡甚至低于添加金霉素的水平。28 日齡和 56日齡斷奶仔豬飼糧中添加耐熱性活性酵母絨毛整齊，高度明顯大于對照組。添加耐熱性活性酵母組的結腸揮發性鹽基氮含量最低，有降低斷奶仔豬結腸揮發性鹽基氮的趨勢。高溫制粒后，普通活性酵母(＋金霉素)在早期斷奶仔豬中應用未發現有添加效應。

在自然狀態下，豬胃腸道存在平衡的微生物區系。實際生產中，由于食物形態和環境的變化，仔豬早期斷奶等應激往往導致消化道微生物菌群失調，使病原菌更易接觸胃腸道黏膜上皮靶細胞和大量繁殖，結果導致仔豬腹瀉和生長不良。益生菌可通過維持腸道內微生態平衡而發揮作用，因此用益生菌來代替抗生素調節胃腸道微生物區系的平衡，提高動物生產性能已成為動物營養研究熱點之一；國內外研究主要集中在乳酸桿菌、芽孢桿菌和雙歧桿菌上。活性酵母為美國 FDA規定允許飼喂的益生菌和我國農業部1999 年批準使用的益生素品種。國外有少量研究報道活性酵母在單胃動物中發揮益生菌作用，但結果并不一致，國內尚無活性酵母應用的系統研究報道。研究結果表明，在早期斷奶仔豬飼糧中添加耐高溫活性酵母有助于提高生產性能，降低腹瀉率和提高機體細胞免疫水平。本試驗研究活性酵母對斷奶仔豬微生物區系、腸黏膜形態和揮發性鹽基氮的影響，探討活性酵母對仔豬的作用效果和機理。

1   材料與方法

1.1   試驗動物

選取 21日齡斷奶三元(杜×大·長)雜種仔豬 96 頭，平均體重為 5.06±0.49 kg，按體重和性別隨機分為 4 個處理組，每個處理組 3 個重復，每個重復 8 頭仔豬，公母各半。試驗時間從仔豬 3 周齡斷奶開始，7 周齡結束。

1.2   試驗飼糧及試驗設計

基礎飼糧組成(%)：玉米 58.55；黃粉 3.00；麩皮 2.00；魚粉 5.00；乳清粉 2.00；豆粕 25.4；石粉 0.74；磷酸氫鈣 0.77；豆油 1.00；鹽酸賴氨酸 0.32；食鹽 0.25；復合預混料 1.00。營養成分含量：消化能 13.56 MJ／kg，粗蛋白質 20.00％，鈣 0.76％，磷 0.63％，有效磷 0.42％，賴氨酸 1.35％，蛋氨酸 0.35％。（活性酵母細胞來源為法國樂斯福公司生產的百福菌和普利菌）活細胞數分別為 8×109個／克和 15×109個／克，其中百福菌為特殊包被處理的耐高溫產品。

試驗共分 4 組：即對照組(添加金霉素 75 克／噸)，百福菌組(1 500 克／噸，不加抗生素)，百＋金組(添加百福菌 1 500 克／噸、金霉素 75 克／噸)，普＋金組(添加普利菌 1 500 克／噸、金霉素 75 克／噸)。

1.3   飼養管理

試驗豬飼養于封閉、半漏縫地板式豬舍，每個重復仔豬飼養于一欄。自由采食、飲水。按照常規飼養和免疫程序進行飼養管理。試驗過程中每天測定最高、最低舍溫，在每天 6:00、14:00、22:00 測定溫度、濕度，保持溫濕度相對恒定。

1.4   測定指標

1.4.1   試驗 10 天屠宰測定，取結腸中段 1 cm，立即置于含甲醛 3.8％的福爾馬林液中，經脫水、包蠟、切片、染色、顯微鏡觀察鏡下取圖和拍照，計算小腸絨毛高度。

1.4.2    試驗結束時測定小腸絨毛高度；無菌法采集盲腸內容物 15 克測定微生物區系(乳酸菌數、大腸桿菌數)；采集結腸內容物 10 克，測定揮發性鹽基氮(VBN)。

1.5   統計分析

測定結果利用 SAS 軟件采用 GLM 程序進行統計分析，并進行多重比較。

2   結果與討論

2.1   微生物區系

活性酵母對斷奶仔豬盲腸微生物區系的影響見表 1。

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一般健康動物體的腸道均具有自身保護功能，以維持胃腸道中菌群的常態平衡，但優勢均衡會因仔豬早期斷奶應激等因素造成腸道微生物失調。若飼糧中連續使用益生菌，可有效的維持腸中有益菌群常態平衡。酵母菌調節豬腸道菌群代謝的資料較少。采用體外結腸模擬技術發現一種活性酵母菌促進豬后腸微生物代謝。本試驗發現，單獨添加耐高溫活性酵母顯著降低(P<0.05) 仔豬盲腸食糜中大腸埃希氏菌數，因而顯著降低大腸埃希氏菌／乳腺酸菌的比例(p<0.05)。百福菌十金霉素組合飼糧和普利菌＋金霉素組也有降低盲腸中大腸埃希氏菌濃度和大腸埃希氏菌/乳酸菌的比例的趨(p>O.05)。試驗發現添加活性酵母對結腸乳酸菌影響較小，可能因乳酸菌為豬后腸微生物區系中的優勢菌之一。本試驗表明，單獨添加耐熱性活性酵母能顯著降低仔豬腸道內容物中大腸埃希氏菌數和調節腸道微生物菌群平衡。百福菌＋金霉素組合飼糧和普利菌＋金霉素組也有一定程度調節腸道微生物菌群平衡的能力。此外，普通活性酵母＋金霉素對腸道微生物菌群平衡的調節作用不顯著，可能與普通活性酵母的熱穩定性不佳有關。本試驗未對熱加工后飼糧中的活性酵母的含量變化進行分析，因此溫度等加工工藝參數對活性酵母的穩定性的影響需進一步研究。

2.2   絨毛結構

小腸絨毛作為小腸的重要組成部分，不但在吸收營養物質上至關重要，且其強有力和有規律的擺動也有助于排斥有害菌群的定植。有報道表明，產酸型活菌制劑按照每頭 1.2億活菌數飼喂新生仔豬，4 日齡小腸絨毛形態發育普遍良好。仔豬斷奶往往造成小腸絨毛組織和形態發生很大變化。本試驗發現，添加耐熱性活性酵母與金霉素組合顯著提高(p<0.05)28 日齡和 56 日齡斷奶仔豬腸絨毛高度，同時從表 2可知，小腸絨毛高度隨著年齡的增加而逐步增加，但56 日齡對照組仍然顯著低于(p<O.05)添加耐熱性活性酵母＋金霉素的水平。單獨添加耐熱性活性酵母也能提高28日齡和56日齡斷奶仔豬腸絨毛高度(p>0.05)。添加普利菌＋金霉素組合對斷奶仔豬 28 日齡腸絨毛高度無顯著影響(p>O.05)，56 日齡甚至顯著低于添加金霉素的水平(p<O.05)。

file:///C:/DOCUME~1/ADMINI~1/LOCALS~1/Temp/msohtmlclip1/01/clip_image004.jpg活性酵母對斷奶仔豬小腸黏膜絨毛形態的組織切片結果見圖1。28 日齡和 56 日齡斷奶仔豬飼糧中添加耐熱性活性酵母絨毛整齊，高度明顯大于對照組，且排列更加整齊。與對照組相比，添加普利菌十金霉素組合對斷奶仔豬腸絨毛結構無顯著改善。結果表明，添加耐熱性活性酵母顯著提高斷奶仔豬腸絨毛高度，一定程度上克服斷奶應激對腸道造成的損傷。

2.3   揮發性鹽基氮

揮發性鹽基氮為蛋白質腐敗產物中的氨態氮和胺基態氮的總和。尿素在腸黏膜中分解產生氨氣，后者嚴重破壞腸細胞的表面，胺類大多數對動物也是有害的。若能抑制胺類和氨產生，可促進動物體的健康及提高生長。由表 3 可知，添加耐熱性活性酵母組的仔豬結腸揮發性鹽基氮含量最低．有降低斷奶仔豬結腸揮發性鹽基氮的趨勢。結果表明，添加耐熱性活性酵母一定程度上降低了蛋白質在大腸內的腐敗產物濃度，降低了胺類物質對腸道黏膜的損傷。高溫蒸汽制粒后，普通活性酵母＋金霉素未有類似的添加效應。