水產飼料中潛在的威脅——霉菌毒素

華牧偉業

　　霉菌毒素是由幾種霉菌如曲霉菌、青霉菌產生的生物毒素，大約超過兩百種霉菌毒素已經被鑒定出來，其中大部分已知是對動物有嚴重危害的。陸生動物養殖生產廠家對這種毒素的危害是很了解的，但是這些毒素對水產養殖的種類的影響，目前還沒有深入的研究。考慮到目前飼料來源方面越來越傾向于采用廉價的，比如用植物蛋白代替魚粉等價格較高的動物源蛋白，飼喂植物源飼料包括其副產品引起的霉菌毒素的污染的嚴重性就大大增加了，必將會出現更多的霉菌毒素污染的情況。因此對霉菌毒素在水產動物毒性方面的研究，就顯得極為迫切和有重要意義。本文綜述了霉菌毒素對動植物的危害，介紹了其在水產飼料方面的毒性，以及霉菌毒素的測定方法和解決辦法。

　　1 霉菌毒素的危害

　　霉菌毒素主要有黃曲霉毒素、CPA、赭曲霉毒素、脫氧瓜蔞鐮菌醇、鐮刀菌毒素等。

　　黃曲霉毒素非常容易污染飼料，比如玉米、花生和棉籽仁。玉米在全世界使用的很大一部分是作為魚類飼料的主要成分，它也可能含有較多霉菌毒素，尤其是黃曲霉毒素，據報道含有多達6 000μg/kg的黃曲霉毒素。美國東南部曾經２７％的玉米樣品含有超過４００μｇ/ｋｇ霉菌毒素，超過５０％的樣品超過１００μｇ/ｋｇ。花生仁和棉籽仁最容易受黃曲霉毒素污染，因而飼料生產應該盡可能的避免接受這種飼料。如果一定要使用，要保證飼料來源沒有被黃曲霉毒素污染，并要檢查所有的進料。棉籽和玉米在蟹和鯰魚中是常見的成分，而且占飼料配方中的２５％～３０％，因此黃曲霉毒素傳染到魚類的可能性是非常高的。

　　目前越來越多的研究表明，霉菌毒素對水產養殖的種類的危害與陸生種類相似。很多的工作都是研究黃曲霉毒素對魚類的危害，而僅有少量是研究霉菌毒素對其它種類比如蝦類的危害。

　　眾所周知，虹鱒魚是水產養殖種類中最容易被養殖水產種類感染的種類之一，有實驗表明，黃曲霉毒素的ＬＤ５０（最大半致死劑量）在５００～１ ０００μｇ/ｋｇ之間。黃曲霉毒素在虹鱒魚中的嚴重危害包括魚鰓變白，減少血紅細胞的數量，破壞肝臟等等。美國Ａｕｂｕｒｎ 大學Ｒｉｃｈａｒｄ Ｌｏｖｅｌｌ博士發現鯰魚和其它暖水性魚類與虹鱒魚相比不太容易感染黃曲霉毒素。當喂養鯰魚半純化飼料，如果含有的黃曲霉毒素達到１０ｍｇ/ｋｇ，喂養１０周后黃曲霉毒素就會表現出較明顯的癥狀，比如顯著降低生長率和血紅細胞，血紅素的數目，還有肝壞死，腎腫大，胃腺壞死等。鮭魚口服１２ｍｇ/ｋｇ（體重）的黃曲霉毒素可以導致胃含物的回流，進入腹腔膜的黃曲霉毒素如果超過１２ｍｇ/ｋｇ就可以引起血紅蛋白的含量降到正常水平的９０％。它可以導致腸內黏膜和血細胞的壞死，這些細胞可以產生胰腺，胃腺，使一些器官顏色變淺。這些副作用反過來又導致魚類生長緩慢，飼料效果變差。

　　盡管研究蝦的工作還很少，但是一些研究已經表明飼料中的霉菌毒素的水平可能出現問題。在泰國和菲律賓已經開展研究可檢測霉菌毒素含量將會產生什么結果的問題。組織病理學研究發現，霉菌毒素Ｂ１對（甲殼動物）肝胰腺的損傷說明蝦飼料中的霉菌毒素可以影響到產量。菲律賓學者發現蝦飼料的霉菌毒素濃度在７３。８μｇ/ｋｇ時蝦生長緩慢，較容易得皮膚病， （甲殼動物）肝胰腺的損傷還會引發其它病情。梁萌青等人在探討黃曲霉毒素對中國對蝦生長的影響時發現，飼料中黃曲霉毒素Ｂ１的含量分別為４７２。０μｇ/ｋｇ、７８。７μｇ/ｋｇ時，若以對照組為１００，中國對蝦成活率均為５５％，增重率分別為４４％、４５％，消化率依次為對照組的７９。４％和８３。２％。對蝦游泳緩慢，個別對蝦在水面游泳，很少抱食，離水后即亡。

　　２ 其它霉菌毒素

　　其它的霉菌毒素也可以引起養殖魚類的生產問題。Ｃｙｃｌｏｐｉａｓｏｎｉｃ ａｃｉｄ（ＣＰＡ）是由曲霉菌和青霉菌產生的毒素，在溫暖的氣候時它常常同黃曲霉毒素被發現在同一樣品里，它甚至比黃曲霉毒素還常見。在１ ５００種飼料和食品樣品檢測中，它是霉菌毒素中發現次數最多的。ＣＰＡ在鯰魚中比黃曲霉毒素更有毒。在一項研究中黃曲霉毒素和ＣＰＡ的含量分別是０，０。１，０。５，２。０和１０。０ｍｇ/ｋｇ， 黃曲霉毒素只有在最高濃度時才會減緩魚類增長，降低其血紅細胞的數量；而ＣＰＡ僅在０。１ｍｇ/ｋｇ時就可以產生同樣的危害，并在較高濃度時還會帶來消化道的壞死。另一研究表明，如果向鯰魚注射７。０ｍｇ每千克體重的ＣＰＡ，魚類就會發生劇烈的痙攣并在３０ｍｉｎ內死去。相似的危害在其它暖水魚類也被發現，比如在羅非魚，鯉魚中。由于ＣＰＡ的濃度可能比其它霉菌毒素大，使這一問題更加惡化，這在氣候炎熱的地區尤其嚴重。

　　赭曲霉毒素也是主要由曲霉菌和青霉菌產生的毒素。它經常危害魚類的腎臟，而且當其和其它毒素一起出現在飼料中會加強其它毒素的危害。赭曲霉毒素包含了７種結構類似的化合物，其中以赭曲霉毒素Ａ的毒性最強。赭曲霉毒素Ａ具有腎臟毒和肝臟毒，在自然界中低濃度存在時主要侵襲腎臟引起腎臟損害。當人、畜攝入被這種毒素污染的食品及飼料后，會發生急性或慢性中毒癥，或致畸、致癌、致突變。口服赭曲霉毒素對生長期的虹鱒魚其半致死量是４。７ｍｇ/ｋｇ。赭曲霉毒素對虹鱒魚的危害有肝臟壞死，顏色變暗，腎臟腫大，死亡率變高等。

　　脫氧瓜蔞鐮菌醇簡稱ＤＯＮ，也就是常說的嘔吐毒素，是由鐮刀霉菌代謝產生的，當生長期處在潮濕天氣時，在小麥中ＤＯＮ是一種很重要的毒素。喂養虹鱒魚ＤＯＮ在０，２。０，５。０和１。０ｍｇ/ｋｇ濃度時，將減緩魚類生長。當喂養虹鱒魚的飼料濃度達到２０ｍｇ/ｋｇ時，會發生拒食現象。

　　鐮刀菌毒素，尤其是單端孢霉毒素，是另一種危害很大的霉菌毒素。玉米赤霉烯酮是最常見的鐮刀菌毒素，是一種雌激素的代謝物。陸生家畜中，比如豬，即使濃度只是在０。６～５。０ｍｇ/ｋｇ之間，也會帶來繁殖問題。在陸生動物中其它的癥狀還有顯著降低生長速度，破壞血紅細胞的再生，引發溢血和組織損傷，降低免疫力。

　　一種被污染的飼料或其成分可能含有超過一種的霉菌毒素。許多研究報導指出，霉菌毒素具有協同作用，兩種毒素綜合起來的危害比單獨作用的危害大得多。加熱和粒化過程中的壓擠并不能除去足夠的毒素。另外，將受污染的飼料和干凈的飼料混合來降低其毒素的含量的做法也沒有被推廣。如果飼料里含有活性的霉菌或者孢子，那么飼料中的毒素的含量將在條件適合時極大的增加。

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　　３ 霉變原因

　　產毒素的霉菌容易在溫暖潮濕的環境下生存，這正是在熱帶亞熱帶占主導地位的水產養殖作業的環境。多數飼料廠在檢查原料是否被黃曲霉毒素感染時是很小心的。但是，其它的霉菌毒素的存在，以及飼料的不安全暴露都會使霉菌毒素在離開廠房后大量增加，特別是如果儲藏期超期的話。

　　許多公司儲藏飼料的條件不太標準，甚至是很簡陋的。現實中飼料可能在運輸過程中變潮，儲藏時可能淋到雨水，甚至會有老鼠和蟲子，這必然導致飼料發霉并被霉菌毒素污染。研究表明，不良的儲藏條件可以導致黃曲霉毒素的增加。６２份蝦飼料樣品中５９份檢測到黃曲霉毒素，并且２２％的儲藏的飼料黃曲霉毒素含量超過５０μｇ/ｋｇ。另外一項的調查顯示所有檢測地區的樣品均檢測到黃曲霉毒素和富馬霉毒素。黃曲霉毒素在一些樣品中的含量發現實際上超過了家畜飼料對哺乳動物和低等脊椎動物有害的限量。黃曲霉毒素Ｂ１在泰國的蝦飼料樣品檢測中達到０。６５１μｇ/ｋｇ。這些研究表明，霉菌毒素尤其是黃曲霉毒素對飼料的污染超出了以前人們想象的程度，已經是很普遍的現象了。

　　4 霉菌毒素的檢測

　　鑒于霉菌毒素對動物危害大、污染廣、且難以去毒，對飼料中毒素的檢測顯得十分重要。自20世紀60年代初以來，建立的檢測方法已達30多種，可歸為3類：生物學方法、化學方法和免疫學方法。

　　4.1 生物學方法

　　該類方法有十余種，最常用的是用于檢測黃曲霉毒素的熒光反應。其原理是利用AF在紫外燈照射下可發出熒光，將待檢樣品處理后，即可用熒光儀檢測。該法特點是可快速定性檢測飼料中有無AF存在，樣品不需很純，混有少量雜質對結果影響不大；缺點是應用范圍小，只能用于在紫外光下發出熒光的毒素的鑒定。

　　4.2 化學方法

　　主要用于毒素定量分析，常用的有薄層層析法和高壓液相色譜法。薄層層析法（ TCL）具有靈敏度高、顯色方便、可同時檢出幾種毒素等優點，缺點是樣品提純比較繁瑣，需要使用標準毒，易造成環境污染。高效液相色譜法（HPLC）具有快速、靈敏度高、準確和自動化等優點，多用于毒素的微量分析，尤其是毒素在組織中殘留量的測定。但由于儀器價格昂貴，難以在基層推廣應用。

　　4.3 免疫學方法

　　與化學方法相比，它具有特異性高、敏感性強、快速方便、以及不需要昂貴儀器設備等優點。與薄層層析法相比，其靈敏度提高500倍，樣品前處理也得到一定程度簡化，易于普及推廣。總之，經過20年的努力，免疫化學技術為霉菌毒素檢測開辟了一條新途徑。

　　5 霉菌毒素的脫毒

　　對付霉菌毒素的污染問題分以下幾種方法：①物理方法，如色差分選技術、密度分離技術及洗滌、熱處理、微波處理、日光降解等；②化學方法，如加還原糖的熱處理、堿處理水解、酸性亞硫酸鹽處理、氨化處理、過氧化氫或重碳酸鈉處理、活性碳處理；③微生物方法：乙醇發酵處理、有益菌群混合制劑。但是最好的辦法就是挑選沒有被污染的飼料及成分，這就要求和供應商之間有一個良好的關系和嚴格的標準，能夠要求供應商保證其可以抑制霉菌的生長。這對在溫暖潮濕的水產養殖地區，尤其是儲藏條件極為簡陋的地方來說是一個極其嚴峻的挑戰。

　　避免鐮刀菌毒素中毒的有效方法之一是開發飼料粘合劑，使之添加少量就可有效地結合腸道中的霉菌毒素。該方法可降低污染飼料的毒力，將該種飼料對生產性能的影響降低到最小。但要找到能與常見的霉菌毒素高特異性結合的粘合劑卻很困難。如果粘合劑缺乏特異性，就會結合一些微量營養素或藥物，這會削弱粘合劑的有效性。小劑量添加就能達到足夠高的結合能力也同樣重要。這是因為粘合劑通常是非營養性的，同時也是稀釋劑，會稀釋飼料的營養濃度，在再循環系統中，粘土可能阻礙或者損害過濾系統，微小的粘土顆粒還會損傷魚蝦類的鰓。需要特別指出的是，有些粘土發現含有二氧（雜）芑（一種強烈致癌物質）可以聚積在魚的脂肪部分，從而引發食品安全問題。其它可以代替粘土的選擇有改進的從酵母細胞內壁上提取的葡甘露聚糖，尤其是一些葡甘露聚糖可以強烈吸收大量的含量極低的霉菌毒素。由于是從酵母中提取的，所以是天然的可溶的而且對動物和人來說是安全的。它在陸生家畜抑制霉菌毒素的效果中表現非常出色，預計它在水產養殖方面應用的前景將會非常廣闊。

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    粘合劑會不會把營養成分也給粘合了